吖啶橙荧光染色法(共1页).doc

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精选优质文档-倾情为你奉上吖啶橙荧光染色法【实验原理】吖啶橙(acridine orange,AO)是最经典的极灵敏的荧光染料,它可对细胞中的DNA和RNA同时染色而显示不同颜色的荧光。其激发峰为492nm,荧光发射峰为530nm(DNA)、640(RNA),它与双链DNA的结合方式是嵌入双链之间,而与单链DNA和RNA则由静电吸引堆积在其磷酸根上。在蓝光(502nm)激发下,细胞核发亮绿色荧光(约530nm),核仁和胞质RNA发橘红色荧光(580nm)。吖啶橙的阳离子也可以结合在蛋白质、多糖和膜上而发荧光,但细胞固定阻抑了这种结合,从而主要显示DNA、RNA两种核酸。【实验用品】1、 器材荧光显微镜、牙签、载玻片、盖玻片、滴管、吸水纸。2、 试剂(1)0.1mol/l pH7.0 PBS液A液:NaH2PO4H2O 2.76g,加蒸馏水至100ml;B液:Na2HPO47H2O 5.36g,加蒸馏水至100ml;取A液16.5mlB液33.5mlNaCl 8.5g,用蒸馏水稀释至100ml。(2)1%吖啶橙原液取0

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