精选优质文档-倾情为你奉上PLFA分析采用温和碱性甲酯化方法100。实验步骤：1） 称3g土壤与15ml 0.2M甲醇化的KOH混匀，放入离心管中。2） 在37C培养1h，每10min漩涡震荡一次。3） 加入3ml 1.0M冰醋酸10ml正己烷，分层。4） 4800r离心15min。5） 取上清移至试管，在氮气下吹干。6） 将试管内磷脂脂肪酸溶解于0.5ml 1:1甲基叔丁基醚:正己烷，转移到气质联用色谱分析用小管待分析。将处理好的样品用Agilent 6890GC/5973MS气质联用仪进行分析，参数设定如下：色谱柱：利用处理后的石英毛细管柱(0.25mm30m0.25m)。 样口温度为250C，不分流进样。采用恒流模式，流速为0.8ml/min，载气为高纯氦气。程序升温：80C (保持2min)，以50C /min的速度升至150C (保持2min)，以2.5C /min的速度升至195C (保持3min)，再以2.5C /min的速度升至240C (保持5min)。电离方式：EI(70eV
