血液RNA提取方法(共1页).docx

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精选优质文档-倾情为你奉上血液RNA提取方法1. 取新鲜的血液(紫管),加入3倍体积红细胞裂解液,混匀后室温放置10分钟,10,000 rpm离心1分钟。2. 彻底吸弃上清,收集白细胞沉淀。3. 每100-200l血液收集的白细胞沉淀加入1ml TRIzol。室温放置5min,使样品充分裂解。4. 4 12,000 rpm 离心10分钟,取上清()。5. 每1ml TRIzol加入200l氯仿,剧烈振荡混匀后室温放置3-5 min,自然分相。6. 4 12,000rpm离心10-15min。样品会分成三层:黄色的有机相,中间层和无色的水相,RNA主要在水相中,把水相转移到新管中(小心吸取水相)7. 在上清中加入等体积冰冷的异丙醇(),室温放置10-20min。8. 4 12,000 rpm离心10min,弃上清,RNA沉淀于管底。9. RNA沉淀中加入1ml 75%乙醇(用RNase-free水配制,),温和振荡离心管,悬浮沉淀。10. 4 5,000-8,000 rpm离心1-2min,弃上清。11. 室温放置1-2

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