1、0毕业论文题 目 血培养病原菌变化趋势分析及药敏分析专 业 医 学 检 验 学生姓名 窦 亚 军 学 号 152120053 河北北方学院继续教育学院毕业论文1血培养病原菌变化趋势分析及药敏分析医学检验学生 窦亚军 学号 152120053【摘 要】目的：回顾性分析血培养标本各病原菌变化趋势及主要病原菌对抗菌药物的敏感性，为临床合理选择抗菌药物提供依据。方法：2013 年 1 月至 2015 年12 月,我院门诊和住院病人的血液和骨髓标本 4743 份，不同患者选择合适的需氧瓶、厌氧瓶及儿童专用培养瓶，采用 Bact/Alert3D 全自动血培养仪进行培养用传统手工方法和 Vitek-32 全
2、自动微生物仪及其鉴定卡对病原菌进行鉴定，采用 K-B 法和 Vitek-32 全自动微生物仪进行药敏。结果：共检出病原菌 635株，其中革兰阳性菌 247 株（38.9%） ；革兰阴性菌 322 株（50.7%） ；真菌 66株（10.4%） 。前几位病原菌依次为表皮葡萄球菌（118 株，18.6%） 、大肠埃希菌（118 株，18.6%） 、甲型副伤寒沙门菌（109 株，17.2%） 、金黄色葡萄球菌（32 株，5.0%） 。结论：革兰阳性菌呈逐年上升趋势，真菌也有较大上升幅度。临床医生应及时了解血培养阳性病原菌的分布特征及耐药情况，合理使用抗生素，减少医院感染。关键词：血培养，病原菌，分布
3、趋势，敏感性，抗菌药物河北北方学院继续教育学院毕业论文2目 录前言.41. 材料与方法.41.1 标本、仪器与试剂.41.1.1 标本来源.41.1.2 仪器与试剂.41.2 方法.41.2.1 Bact/Alert 全自动血培养仪上机检测 .41.2.2 细菌的鉴定.41.2.3 细菌的药敏.51.2.4 统计方法.52. 结果.52.1 病原菌的分布情况.52.2 病原菌药敏分析.72.2.1 葡萄球菌对抗菌药物的敏感率.72.2.2 主要革兰阴性菌对抗菌药物的敏感率.82.2.3 真菌的药物敏感率.93. 讨论.94. 结论.10参考文献.11略缩词.11附：综述.12河北北方学院继续教
4、育学院毕业论文3前 言败血症是严重威胁人们健康的疾病之一，尤其是耐药株的增加，使这些感染的治疗更加困难。败血症无特异的临床表现，目前血培养阳性仍是诊断本病的金标准。为了解菌血症和败血症患者病原菌的分布及对常用抗生素的耐药情况， 为及时准确地选择抗生素提供资料，尤其是为早期选用抗生素提供用药依据，因此对 3 年来送检的血培养标本病原菌分布、药敏特征进行了回顾性分析。1.资料与方法1.1 标本、仪器与试剂法1.1.1 标本来源 2013 年 1 月至 2015 年 12 月我院门诊和住院病人的血液和骨髓标本 4743份，严格无菌方法采血,儿童 3-5ml，成人采血 5-10ml,注入 Bact/A
5、lert3D 配套的血培养瓶中送检。标本尽量在抗生素使用前和高热时采集。1.1.2 仪器与试剂 Bact/Alert3D 全自动血培养仪及其配套的血培养瓶,Vitek-32 全自动微生物仪及其鉴定卡,均为法国梅里埃公司产品。血平板与巧克力平板购自广州迪景公司。质控菌株:大肠埃希菌 ATCC25922, 金黄色葡萄球菌 ATCC25923,铜绿假单胞菌 ATCC27853。1.2 方法1.2.1 Bact/Alert3D 全自动血培养仪上机检测 严格按照说明书操作,仪器给出阳性信号时及时取出培养瓶,转种血平板与巧克力平板（CO2 环境）,放置 35孵箱孵 18-24 小时,同时进行涂片、革兰染色
6、、镜检。仪器设置的培养时间为 5 天,满 5 天未检测到细菌生长的,仪器发出阴性信号,及时取出阴性瓶,盲种血平板与巧克力平板,同时进行涂片、革兰染色、镜检。河北北方学院继续教育学院毕业论文41.2.2 细菌的鉴定 用 Vitek-32 全自动微生物仪及其鉴定卡鉴定。1.2.3 细菌的药敏 用 KB 法和 Vitek-32 全自动微生物仪进行药敏。1.2.4 统计方法 两组阳性率以及阳性百分比用卡方检验，P0.05 认为有统计学意义。数据采用 SPSS11.5 统计软件包进行计算。2.结 果2.1 病原菌的分布情况2013 年 1 月-2015 年 12 月期间，从血标本中共分离病原菌株 635
7、 株，阳性率 13.3%。其中革兰阳性菌 247 株（占 38.9%） ，呈上升趋势；革兰阴性菌 322株（占 50.7%） ，也呈上升趋势。肠杆菌科中甲型副伤寒由 06 年的 80 株减低到08 年 13 株，呈下降趋势；真菌 66 株（占 10.4%） ，由 06 年的 2.9%上升至 08年的 15.9%，上升幅度较大。革兰阳性菌以葡萄球菌属的细菌为主，其中表皮葡萄球菌最多，共 118 株，占 18.6%。肠杆菌科的细菌是最常见的革兰阴性菌，其中大肠埃希菌最多，共 118 株，占 18.6%。整体分布情况见表 1。 表 1 2013 年-2015 年血培养病原菌分布Table 1 Dis
8、tribution of pathogen during 2013-20152013 2014 2015细菌名称 株数（百分率） 株数（百分率） 株数（百分率） 2 X P 值葡萄球菌属 23（16.5%） 90（44.6%） 91（30.8%） 30.027 0金黄色葡萄 9 16 7表皮葡萄球 13 59 46其它葡萄球 1 15 38肠球菌属 0（ 0.0%） 11（5.45） 10(3.4%) 7.661 0.022屎肠球菌 0 6 7河北北方学院继续教育学院毕业论文5粪肠球菌 0 6 7链球菌属 2（ 2.2%） 12（ 5.9%） 7 5.444 0.066A 群溶血性链球菌 0
9、2 2甲型溶血性链球菌 2 8 4肺炎链球菌 0 2 1肠杆菌科 105（75.5%） 65（32.2%） 129（ 43.7%） 64.53 0甲型副伤寒 80 16 13伤寒 4 10 8大肠埃希氏菌 13 27 78肺炎克雷伯菌 6 4 12其它肠杆菌 2 8 18非发酵菌 4（ 2.9%） 8（ 4.0%） 11（ 3.7%） 0.297 0.862铜绿假单胞菌 3 6 9不动杆菌属 1 2 2其它非发酵菌 0 0 0革兰阳性杆菌 0 0 0棒状杆菌 0 0 0真菌 4（ 2.9%） 15（ 7.4%） 47（15.9%） 20.086 0白色假丝酵母菌 3 6 12近平滑假丝酵母菌
10、0 3 1热带假丝酵母菌 1 1 11新型隐球菌 0 0 0光滑假丝酵母菌 0 5 7其它假丝酵母菌 0 0 16河北北方学院继续教育学院毕业论文6合计 138 202 2952.2 病原菌药敏分析2.2.1 葡萄球菌对抗菌药物的敏感率葡萄球菌是检出株数最多的革兰阳性菌,金黄色葡萄球菌对青霉素 G,四环素敏感率较低（40%） 。呋喃妥因、万古霉素和利奈唑烷的敏感率较高，分别为100%、100%、96.7%；凝固酶阴性葡萄球菌对氨苄西林/舒巴坦、苯唑西林、复方新诺明、红霉素、青霉素 G、头孢唑林的敏感率较低(40%),对呋喃妥因、万古霉素和利奈唑烷的敏感率高,分别为 91.9%、100%、83.
11、1%。金黄色葡萄球菌对大多数药物的敏感率均较凝固酶阴性葡萄球菌高。MRSA(耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌)与 MRCNS(耐甲氧西林的凝固酶阴性葡萄球菌)分别为48.3%、83.3%。 （见表 2）表 2 葡萄球菌对抗菌药物的敏感率Table2 Sensitivity rate of Staphylococcus to commonly used antimicrobial agents金黄色葡萄球菌 凝固酶阴性葡萄球菌抗生素/细菌株数 敏感率（%） 株数 敏感率（%）氨苄西林/舒巴坦 31 51.7 160 13.1苯唑西林 29 51.7 156 16.7呋喃妥因 30 100.0 160
12、91.9复方新诺明 30 70.0 157 24.2红霉素 30 53.3 163 12.9克林霉素 29 58.6 157 42.0利奈唑烷 30 96.7 154 83.1莫西沙星 29 69.0 155 54.2青霉素 G 29 20.7 159 3.8河北北方学院继续教育学院毕业论文7庆大霉素 32 75.0 170 62.4四环素 31 38.7 160 40.0头孢唑啉 26 51.7 115 17.4万古霉素 31 100.0 169 100.0左旋氧氟沙星 32 71.9 167 53.32.2.2 主要革兰阴性菌对抗菌药物的敏感率大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌是主要产 ESBLs
13、的菌株，其产 ESBLs 阳性率分别为 39.9%、17.8%。大肠埃希菌是检出株数最多的革兰阴性菌，其对氨苄西林/舒巴坦、复方新诺明、头孢唑林、左旋氧氟沙星、头孢呋辛的敏感率较低(40%),对亚胺培南、美洛培南、头孢西丁的敏感率较高，分别为99.2%、98.4%、95.1%。肺炎克雷伯菌对氨苄西林/舒巴坦、复方新诺明的敏感率较低，对阿米卡星、亚胺培南、美洛培南、头孢西丁的敏感率较高，分别为85.7%、90.9%、85.7%、85.7%。铜绿假单胞菌对氨苄西林/舒巴坦、呋喃妥因、复方新诺明、头孢曲松、头孢唑啉、头孢呋辛钠、头孢呋辛酯敏感率较低(40%),对阿米卡星、环丙沙星、妥布霉素的敏感率较
14、高,分别为100%、88.9%、88.9%。 （见表 3）表 3 主要革兰阴性菌对抗菌药物的敏感率Table 3 Sensitivity rate of three common gram-negative to commonly used antimicrobial agents大肠埃希菌 肺炎克雷伯菌 铜绿假单胞菌抗生素/细菌 株数 敏感率（%）株数 敏感率（%）株数 敏感率（%）阿米卡星 117 88.9 21 85.7 18 100.0氨苄西林 115 13.0 20 0.0 18 0.0氨苄西林/舒巴坦 54 16.7 13 19.0 9 0.0呋喃妥因 54 90.7 13 46.
15、2 9 11.1复方新诺明 57 22.8 13 23.1 9 11.1河北北方学院继续教育学院毕业论文8环丙沙星 56 46.4 13 69.2 9 88.9哌拉西林/他唑巴坦 116 83.6 21 71.4 18 50.0庆大霉素 115 40.0 22 59.1 18 72.2头孢吡肟 118 49.2 22 50.0 18 50.0头孢曲松 54 51.9 13 53.8 9 11.1头孢他啶 118 55.1 22 50.0 18 46.7头孢唑林 115 38.3 20 45.0 18 0.0妥布霉素 57 42.1 15 60.0 9 88.9亚胺培南 117 99.2 22
16、90.9 18 61.1左旋氧氟沙星 116 37.1 22 72.7 18 66.7美洛培南 64 98.4 7 85.7 9 77.8头孢呋辛钠 61 32.8 7 42.9 9 0.0头孢呋辛酯 60 33.3 7 42.9 9 0.0头孢西丁 61 95.1 7 85.7 - -ESBL（+） 47 39.9 4 17.82.2.3 真菌的药物敏感率（见表 4）表 4 真菌的药物敏感率Table 4 Sensitivity rate of fungal to commonly used antimicrobial agents抗生素/年份 株数 2013 年 株数 2014 年 株数
17、2015 年5-氟胞嘧啶 4 100.00 15 100.00 47 97.96两性霉素 B 4 100.00 15 100.00 47 100.00氟康唑 4 100.00 15 73.33 47 71.42伊曲康唑 4 100.00 15 74.12 47 71.33伏立康唑 - - 15 86.67 47 97.963.讨 论本研究中 2013 年至 2015 年血培养共分离病原菌 635 株，革兰阳性菌 247河北北方学院继续教育学院毕业论文9株，占 38.9%；革兰阴性菌 322 株，占 50.7%。革兰阳性菌 13 年 16.5%上升至30.8%，呈逐年上升趋势，与文献 1报道相似
18、，条件致病菌表皮葡萄球菌的比例超过了金黄色葡萄球菌，跃居于首位，与文献报道相符 2。本研究中甲型副伤寒由 13 年的 80 株减低到 15 年 13 株，呈下降趋势，说明本地区对其控制较好。研究中真菌的分离株数和种类逐年增加，由 13 年的 2.9%上升至 15 年的15.9%，与解晓珍等 3报道相近，上升幅度较大。真菌检出比例占病原菌总数的 4.6%，以白色念珠菌多见。真菌的分离株数和种类逐年增加，可能是由于大剂量的抗生素、免疫抑制剂和激素的广泛应用而导致人体免疫力的下降所致4,且联合应用抗菌药物或长期应用广谱抗生素的现象极其普遍,致使由真菌引起的二重感染逐年增多,临床多见于引起下呼吸道感染
19、和血液感染,真菌血症常威胁生命,患者死亡率较高 5。革兰阳性菌检出株数最多的是葡萄球菌,葡萄球菌对呋喃妥因、万古霉素、利奈唑烷的敏感率高，未出现万古霉素耐药株。金黄色葡萄球菌对大多数药物的敏感率均较凝固酶阴性葡萄球菌高。MRSA 与 MRCNSA 分别为 48.3%、83.3%，高于顾兵等的报道 6。由于目前临床上治疗 MRSA 感染的主要抗菌药为糖肽类(如万古霉素) ,因而耐万古霉素金葡菌(VRSA)的出现及传播尤其值得关注,最近已报道发现了携带 VanA 基因的 VRSA7，我国目前虽尚未见耐万古霉素 VRSA的报道，但应当警惕这类菌株的出现。主要革兰阴性菌对抗菌药物的敏感率，大肠埃希菌是
20、血培养分离最多的革兰阴性杆菌，共 118 株，ESBLs 阳性率为 39.9%。其对亚胺培南均敏感，对呋喃妥因、阿米卡星、美洛培南、哌拉西林敏感性较好，对其它抗生素的耐药率达 45%以上。肺炎克雷伯菌 ESBLs 阳性率为 17.8%，对阿米卡星、亚胺培南、美洛培南、头孢西丁的敏感率较高。铜绿假单胞菌对阿米卡星、环丙沙星、妥布霉素的敏感率较高。由此可见阿米卡星可作为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及铜绿假单胞菌的首选用药之一。本实验产 ESBLs 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别为 39.9%、17.8%,产 ESBLs 菌株对头孢类抗生素的敏感率低,虽然 ESBLs 在各地区、各医院间检出率差异明显不同 8，但通过本组资料仍可看出 ESBLs 菌株的检测是非常必要的。 真菌对氟康唑和伊曲康唑的敏感性较低，对其它抗真菌药较敏感(90%)
