精选优质文档-倾情为你奉上细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。基因组DNA断裂时,暴露的3-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上荧光素(FITC)标记的dUTP(fluorescein-dUTP),从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL法检测细胞凋亡的原理。TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂,但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。这样一方面可以把凋亡和坏死区分开,另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。针对问题2( TUNEL法的实验原理是什么?):基本原理: 对不同组织切片先增加细胞膜通透性,然后让rTDT和bio标记的dUTP进入细胞内,在rTDT的辅助下dUTP与核断裂的DNA 3-OH结合,再用HRP标记的链霉亲和素与dUTP上的biotin结合(每个链霉亲和素至少可以再结合3个biotin分子),最后用DAB、过氧化氢与S