精选优质文档-倾情为你奉上1、 质粒提取不成功的原因（1） 裂解时间太长。加入溶液P2后裂解时间不应超过5分钟。（2） 吸附时间不够（3） 溶解时间不够（4） 大肠杆菌老化。建议涂布平板培养后。重新挑选新菌落进行液体培养。（5） 质粒拷贝数低。由于使用低拷贝数载体引起的质粒DNA提取量低，可更换具体相同功能的高拷贝数载体。（6） 菌体中无质粒。有些质粒本身不能在某些菌种中稳定存在，经多次转接后有可能造成质粒丢失。例如。柯斯质粒在大肠杆菌中长期保存不稳定，因此不要频繁转接，每次接种时应接种单菌落。另外，检查筛选用抗生素使用浓度是否正确。碱裂解不充分。使用过多菌体培养液，会导致菌体裂解不充分，可减少菌体用量或增加溶液P1、P2和P3的用量。对低拷贝数质粒。提取时，可加倍使用溶液P1、P2和P3，可能有助于增加质粒提取量和质料质量。（7） 溶液使用不当。溶液P2、P3在温度较低时可能出现浑浊，应置于37保温片刻直至溶解为清亮的溶液，才能使用。（8） 吸附柱过载。不同产品中吸附柱吸附能力不同，如果需要提取的质粒量很大，请分多次提取。若用富集培养基，例如TB或
