细胞的基本知识.ppt

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1、第三章 细胞生物学研究方法第一节 细胞形态结构的观察方法第二节 细胞组分的分析方法第三节 细胞培养、细胞工程与显微 操作技术返回1.1 光学显微镜1.1.1普通光学显微镜D 0.61 NA N A n sin(/2) l n: 折射率l D: 分辨率l N A: 镜口率。低倍镜 0.28,高倍镜 0.65,油镜 1.25.l 可见光 : 400 760 nm, 一般显微镜放大倍数在 1000 1500倍,分辨率 0.2m.l 紫外光 : 390 130l 电子束 : 100V, 1.23; 10,000V, 0.122; 100,000V 0.0387 n倒置显微镜 NIKON-TMD l1.

2、1.2紫外线显微镜l 波长短于 400nm, 分辨率提高一倍。l 可观察细胞内具有紫外线吸收能力的物质如核酸( 260nm)、 蛋白质(280nm).l 镜片石英玻璃,价格昂贵。l1.1.2荧光显微镜l 叶绿体在紫外线照射后发出荧光。l 可加荧光染料如酸性品红、 啶橙,中性红、甲基绿。n荧光显微镜 Olympus BX-501.1.4 暗视野显微镜利用丁达尔现象,只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜。 背景为黑,观察核、线粒体,分辨率可提高 40倍。1.1.5相差显微镜和微分干涉显微镜相差显微镜:由光程差变成振幅差,明者更明,暗者更暗,立体感增强。物镜中增加一环形相板,光源聚光器中增加一环形光阑。微分干涉显微镜:利用平面偏振光,光线经棱镜折射后分成两束,在不同时间经过样品后两束光再会合,从而样品中厚度上的微小差异就转化成明暗区别,增加反差。 观察培养的活细胞。

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