分光光度法测定蔗糖酶的米氏常数(共3页).doc

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精选优质文档-倾情为你奉上分光光度法测定蔗糖酶的米是常数一实验目的: 1. 用分光光度法测定蔗糖酶的米是常数和最大反应速率。2. 了解底物浓度与酶反应速率之间的关系3. 掌握分光光度计的使用方法二实验原理:酶是由生物体内产生的具有催化活性的蛋白质。它表现出特异的催化功能,因此叫生物催化剂。酶具有高效性和高度选择性,酶催化反应一般在常温、常压下进行。在酶催化反应中,底物浓度远远超过酶的浓度,在指定实验条件时,酶的浓度一定时,总的反应速率随底物浓度的增加而增大,直至底物过剩此时底物的浓度不再影响反应速率,反应速率最大。Michaelis应用酶反应过程中形成中间络合物的学说,导出了米氏方程,给出了酶反应速率和底物浓度的关系:米氏常数是反应速率达到最大值一半时的底物浓度。测定不同底物浓度时的酶反应速率,为了准确求得,用双倒数作图法,可由直线方程:以为纵坐标,为横坐标,作图,所得直线的截距是,斜率是,直线与横坐标的交点为。本实验用的蔗糖酶是一种水解酶,它能使蔗糖水解成葡萄糖和果

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