质粒抽提详细步骤(共2页).doc

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精选优质文档-倾情为你奉上质粒提取实验步骤摇菌:(先倒入锥形瓶再消毒)1 将配好的LB培养液高温消毒后,放入40C冰箱,冷却;2 在酒精灯旁操作,向锥形瓶中加入100mlLB,加入150ul氨苄(看抗性);3 再向锥形瓶中挑入少量菌(液体:6080ul;固体:绿豆大小);4 放入摇床,摇一夜。LB培养液的配方1)胰化蛋白胨() 10g/L(tryptone)2)酵母提取物 5g/L(yeast extract)3)Nacl 10g/L4)去离子水(双蒸水)950ml 终体积为1000ml5)配好后,需高温消毒(纱布或报纸包)质粒提取:QIAGEN plasmid Midi kit(25)试剂盒 准备2个50mlEP管,提2个质粒一共要6个50mlEP管。使用前注意事项:1)P1在使用前要加入RNAase,终浓度为100ug/ml,P1一直放40C。2)事先溶解P2(天冷时P2会出现沉淀,应放37 0C水浴溶解)。3)预冷至P1、P3(P2作用为裂解细

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