转化-摇菌-提质粒(共2页).docx

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精选优质文档-倾情为你奉上一、感受态细胞XL-1转化实验(1)5ngDNA+100l感受态细胞XL-1于1.5ml离心管中,混匀,冰浴30min。(2)42oC, 45s。(3)冰浴2min。(4)涂布于固体LB平板上(含50mg/ml 氨苄青霉素, 37 oC预热)。(5)放入37 oC恒温孵育箱,待液体吸收完全后,倒置孵育16-18h。(6)保鲜袋密封后,倒置放于4oC冰箱保存。二、菌液的培养与质粒的提取 1.每个样本挑取5个细菌,进行摇菌,提取质粒。(一个细菌一支管) 在50ml离心管里加入5ml液体LB和5l 50mg/ml氨苄青霉素,用200l枪头挑取过夜培养LB平板上的单克隆,枪头打入离心管中,置于37oC摇床,250r/min培养1618h,质粒提取。(老师,这里要先挑取一个细菌进行摇菌后再分成五支离心管重新摇菌,还是直接挑取5个菌落直接摇菌)质粒提取(采用天根质粒小量多次提取试剂盒提取,步骤如下):(1) 吸附柱中加入500l平衡液BL,13000rpm离心1min。倒掉收集管中废液,吸附柱放回收

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