1、分子诊断及基因检测在临床中应用的进展,文献检索及学术趋势,检索策略：查询2012-2018年间，以“gene diagnostic” or “molecular diagnostic”为关键词；主要查找遗传学领域文献和肿瘤学领域的文献，发表文献量较大，在两个领域中均有广泛应用,过去 宏观水平检测,检测只是判断有无疾病,根据部位和改变程度诊断疾病,实验室诊断技术的进步,今天 分子水平检测,根据细胞生物学或DNA诊断疾病,检测可区分疾病类别预测特定治疗结果预测不良反应监测疾病进展,明天 预测性检测,多技术平台，更高精确度多因素分析常见和复杂疾病多基因信息作为疾病诊断标准,新的检测标本:尿、唾液、呼
2、吸气、其他更多应用诊断性影像学,生化-细胞-染色体-CNV-STR-SNP水平上,分子诊断及基因诊断在遗传学中的应用进展分子诊断及基因诊断在肿瘤学中的应用进展,基于分子诊断的遗传学应用遗传疾病风险筛查查出孟德尔疾病致病基因,早期疾病预测孕前/胚胎植入前筛查,药物基因组学风险分层,药物效应和剂量不良反应预测 常见疾病风险风险预测风险分层查出早期的行为异常风险显现,2018/7/8,7,遗传学疾病的筛查应用,2018/7/8,8,1、间期荧光原位杂交,iFISH,8,Only 24h,2018/7/8,9,2、Q-PCR荧光定量PCR,荧光标记的引物扩增STR片段，然后经毛细管电泳检测扩增的峰型来
3、判断扩增位点倍性。,2018/7/8,10,3、MLPA 多重连接探针扩增,如果检测的靶序列发生点突变或缺失、扩增突变，那么相应探针的扩增峰便会缺失、降低或增加，因此，根据扩增峰的改变就可判断靶序列是否有拷贝数的异常或点突变存在。,2018/7/8,11,4、High-throughput sequencing（二代测序-非侵入产前诊断）,胎儿,2018/7/8,12,5、Array-CGH,2018/7/8,13,携带不同荧光的待测样本和对照样本竞争性地与液相磁珠上的21chr BAC进行杂交，再检测荧光强度评价待测样本剂量，同aCGH！,6、BOBs液相芯片,分子诊断技术的发展诊断精准程度
4、的发展,发病易感遗传缺陷,早期查出,针对性预防疾病发展,预测对药物的可能反应,监测药物反应和发病反复,健康状态,无症状疾病状态,慢病治疗,有症状疾病状态,个体化医学当今医疗保健重点,病人分层 / 治疗未来医疗保健重点个体化药物治疗,疾病基因组学,药物基因组学,遗传学疾病的治疗应用个体化治疗,?,均有哮喘急性发作,受体遗传变异引起疗效和安全性个体差异哮喘发作终止,均吸入2肾上腺素受体激动药沙丁胺醇(Albuterol)沙美特罗 (Salmeterol)死亡2肾上腺素受体基因变异 (Arg/Arg16),人数,药物代谢酶遗传变异引起疗效和毒性个体差异,使用相同剂量后体内药物总量,酶活性过高,酶活性
5、适中,酶活性过低,无效,毒性,血内药物浓度,疾病相关基因疾病预测与诊断,药物作用相关基因个体化药物治疗,罕见孟德尔遗传病致病基因,常见复杂疾病易感基因,药物代谢/作用基因,药物代谢/作用SNPs,疾病预测-对疾病的新认识和控制,个体化用药-最佳药物反应,伦理、法律、社会问题,分子诊断是实施优生优育及个体化治疗的必备技术 基因检测,分子诊断及基因诊断在遗传学中的应用进展分子诊断及基因诊断在肿瘤学中的应用进展,基因与肿瘤细胞生物学各个方面均有关,分子诊断在肿瘤学应用的主要技术,诊断,预后评估,判定治疗效果,内容,基因突变,基因表达,有无,类型,位置,效应,有无,水平,效应,临床应用,检测技术,PC
6、R,基因测序,蛋白芯片,核酸杂交,免疫化学,样本,内容,与遗传有关的基因突变,检测技术,PCR,基因测序,蛋白芯片,基因测序,免疫化学,血液,肿瘤组织,血浆DNA变化,血浆变中癌基因表达检测,肿瘤标志物的检测,肿瘤细胞的基因突变,肿瘤细胞的基因表达,肿瘤细胞的蛋白表达,PCR,BRACAnalysisCampath (坎帕斯 )CD52人源化单克隆抗体Herceptin (赫赛汀)Camptosar (伊立替康 )Gleevec(格列卫)Oncotype DX,乳腺癌判断病情慢性淋巴细胞性白血病选药乳腺癌确定剂量结肠直肠癌判断药物疗效慢性髓细胞性白血病复发风险乳腺癌,基因测序, 风险分析轻微后遗症HER2基因表达UGT1A1多态性分析BCR-ABL荧光定量多变量分析,分子诊断在肿瘤学的临床应用分类及举例 疾病易感,发现生物标记假说候选生物标记确证开发原型检测方法,确证候选生物标记临床确证体外诊断试剂分析方法优化和开发管理部门批准,应用各实验室采用审核实验室结果的室间差临床和实验室培训,分子诊断方法的发现、确证和应用,THANK YOU !,
