1、第四章单克隆抗体与基因工程抗体的制备第一节 杂交瘤技术的基本原理一、杂交瘤技术二、阳性杂交瘤细胞的克隆化培养与冻存第二节 单克隆抗体的制备一、单克隆抗体的产生二、单克隆抗体的纯化三、单克隆抗体的性质鉴定四、单克隆抗体的特性第三节 基因工程抗体制备一、人源化抗体 二、小分子抗体三、抗体融合蛋白四、双特异性抗体五、噬菌体抗体库技术第四节 单克隆抗体的应用一、检验医学诊断试剂二、蛋白质的提纯三、小分子抗体的应用四、抗体融合蛋白的应用五、双特异抗体的应用六、抗体库技术的应用和前景思考题小结第一节 杂交瘤技术的基本原理杂交瘤技术原理：聚乙二醇（ PEG）： 细胞融合剂，使免疫的小鼠脾细 胞与小鼠骨髓瘤细
2、胞融合HAT培养基的选择培养： 反复的免疫学检测筛选克隆化增殖的杂交瘤 细胞系单克隆抗体生成： 接种杂交瘤 细胞于小鼠腹腔，腹水中即可得到高效价的单克隆抗体抗体种类：第一代抗体 多克隆抗体 （ polyclonal antibody)第二代抗体 单克隆抗体（ monoclonal antibody)第三代抗体 基因工程抗体（ genetic engineering antibody)B淋巴细胞 :寿命短 ,分泌特异系性抗体骨髓瘤细胞： 寿命长杂交瘤细胞： 寿命长，单克隆抗体流程一、杂交瘤技术不产生 Ig的重链和轻链HGPRT-;TK-与提供淋巴细胞的动物品系相同（一）小鼠骨髓瘤细胞动 物：BALB/c小鼠7 12周 龄20g 25g体重（二）免疫脾细胞细胞性抗原：（ 12） 10 7/只，不加佐剂， 23周重复一次可溶性抗原：首次，完全福氏佐剂 +100微克抗原， 36周100200微克抗原，融合前 3天，加强免疫免疫小鼠
