1、 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体植物体细胞杂交融合的原生质体 AB再生出细胞壁杂种细胞AB杂种植株脱分化愈伤组织再分化植物组织培养原生质体 B原生质体 A去 壁去 壁人工诱导植物细胞 A植物细胞 B动物细胞融合动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞。2.过程:灭活的病毒 (丧失感染性、保留抗原结构)原理: 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用,使细胞相互凝聚,细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。3、动物细胞融合基本原理:细胞膜的流动性4、诱导
2、方式物理法:化学法:生物法:灭活的病毒电激、振动、离心电激、振动、离心聚乙二醇(聚乙二醇( PEG) 例如:仙台病毒5、实现动物细胞融合有什么意义呢?打破生殖隔离,使远缘杂交成为可能;重要用途: 制备单克隆抗体。制备单克隆抗体。6、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比 较项 目 植物体 细 胞 杂 交 动 物 细 胞融合细 胞融合原理细 胞融合的方法诱导 方法用途 克服远源杂交不亲和 ,获得杂交植株细胞膜的流动性细胞膜的流动性去除细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分散后诱导细胞融合物理(离心、振荡、电刺激)化学(聚乙二醇)物理、化学方法(同左)灭活的病毒单克隆抗体传统的抗体的生产方法及缺陷是什么?1动物在免疫反应过程中,体内产生特异性抗体种类可达百万种以上,每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。2但每一个淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。 3、在体外,一个淋巴细胞是不可能无限增殖的。 产量低、纯度低;而且制备抗体特异性差。信息:那么,如何大量获得化学性质单一、特异性强的抗体?一个 B淋巴细胞骨髓瘤细胞杂种细胞动物细胞培养技术1、设计方案:动物细胞融合创始人:米尔斯坦创始人:米尔斯坦单克隆抗体(既能产生特异性抗体,又能大量繁殖)2、单克隆抗体 (概念)由单个 B淋巴细胞经过无性繁殖(克隆),形成基因型相同的细胞群,这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。