1、STAT3基因在 CD4 T细胞介导抗肿瘤免疫中的重要作用作者姓名（排序）： Yanwei Shen, Weiyi Peng, Yoshihiro Miyahara, Shu Zheng, Rong-Fu Wang, and Helen Y. Wang作者单位：浙江大学肿瘤研究所第一作者姓名及身份证号码：沈彦伟 330102198110071215通讯作者姓名：郑树，王荣福1背景STAT家族是介导细胞因子、生长因子信号通路上启动蛋白转录的重要转录因子，它们在许多信号通路的细胞分子事件中都起到重要作用，例如细胞分化、细胞增殖和存活。其中 STAT3基因除了在正常生理状态下发挥重要作用，其在肿瘤发
2、生过程中参与了诱导细胞化生，而与肿瘤发病密切相关。 已有多组报导显示，抑制 STAT3的表达能够杀伤荷瘤小鼠体内的肿瘤，证明其抑制剂的使用能够增强机体抗肿瘤作用。在本研究中，我们使用 LoxP-Cre 系统建立了在 CD4+ T细胞中特异性敲除 STAT3基因的小鼠。此小鼠基本生理状况与野生型没有明显差别，但在体外培养的 CD4+ T细胞相对于野生型，却在 TCR激活后表现出增殖减弱、凋亡增加。异体瘤接种实验表明，接种 B16黑色素瘤于 CD4-STAT3 缺陷型小鼠后，其生长速率高于野生型。 T细胞过继治疗模型显示，此种 STAT3 缺陷的 CD4+ T细胞无法扩增 CD8+ T细胞，而导致
3、无法清除 B16黑色素瘤。进一步研究显示， STAT3 缺陷的 CD4+ T细胞在 TCR激活后，相对于野生型的 CD4+ T细胞，表达 Bcl-2更低， Bak 更高。 这一结果提示 STAT3基因对于 TCR激活后的 T细胞存活十分重要，其能保护 T细胞免于凋亡，而得到健全的 T细胞介导抗肿瘤免疫能力。方法鉴定 STAT3-/- CD4+ T 细胞表型CD4+ T细胞分化能力及细胞因子释放分析CD4+ T细胞增殖能力分析和凋亡分析B16异体瘤移植实验及 T细胞过继免疫实验STAT3及相关信号通路分析1. CD4+ T 细胞 STAT3 敲除小鼠的构建结果Fig1. Loxp-Cre体系的建
4、立及 western blot 分析CD4+ T 细胞中 STAT3敲除2. STAT3-/- CD4+ T 细胞表型Fig2. STAT3-/-小鼠的 CD4+和 CD8+ T细胞与野生型 STAT3f/f小鼠没有明显差别。3. STAT3-/-敲除小鼠及 STAT3f/f野生型小鼠的CD4+ T 细胞亚群及诱导分化能力分析Fig3A. nTreg及诱导 Th17流式细胞术分析，以及 Treg抑制功能分析。Fig3B. ELISA结果显示 STAT3-/-和 STAT3f/f 小鼠的 CD4+ T 细胞在 TCR激活后细胞因子释放能力差异Fig4. STAT3-/-的 CD4+ T 细胞在 TCR激活后增殖减少、凋亡增加Fig5. B16异体瘤移植实验及 T细胞过继免疫实验，检测STAT3-/-的 CD4+ T 细胞介导的抗肿瘤免疫能力
