垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质一、实验目的学习SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS PAGE)测定蛋白质的分子量的原理和基本操作技术。二、实验原理蛋白质是两性电解质，在一定的 pH 条件下解离而带电荷。当溶液的 pH 大于蛋白 质的等电点(pl)时，蛋白质本身带负电，在电场中将向正极移动；当溶液的pH小于蛋白质的等电点时，蛋白质带正电，在电场中将向负极移动；蛋白质在特定电场中移动 的速度取决于其本身所带的净电荷的多少、蛋白质颗粒的大小和分子形状、电场强度 等。聚丙烯酰 胺凝胶 是由一 定量 的丙烯 酰胺和 双丙 烯酰胺 聚合而 成的 三维网 状孔结 构。本实验 采用不连 续凝 胶系 统，调 整双 丙烯 酰胺用 量的 多少 ，可制 成不 同孔 径的 两 层凝 胶；这 样，当含有不同分子量的蛋白质溶 液通过这两层凝胶时，受阻滞的程度 不同 而表现 出不同的迁移率。由于上层胶的孔 径较大，不同大小的蛋白质分子在通 过大 孔胶时 ，受到的阻滞基本相同，因此以相 同的速率移动；当进入小孔胶
