精选优质文档-倾情为你奉上Transwell是检测细胞侵袭能力的检测方法我们所使用的是Chemicon公司的ECM554,基质胶已经包被好了,买来就可以用,很方便,而且我们算过,跟自己买胶来包被价格相差不大。这种胶4度下很软,37度则变得比较坚硬,因此用前应先放在培养箱中10分钟作用,使胶完全凝固。该试剂盒对穿过膜的细胞进行荧光染色,再用裂解液裂解细胞后检测荧光值。我们在实际使用的时候对穿过膜的细胞采用1%结晶紫染色,镜下计数细胞数目。结晶紫也可以用33%醋酸溶解,再用酶标仪570nm检测,同样可以反应穿过细胞数因为基质胶的厚度直接影响穿过膜的细胞数,因此建议有条件的话还是买这类已经铺好胶的试剂盒,比较可靠。说明书该公司网上可以下载,对原理也有比较详细的阐述,可以去查一下。我们做的时候,上室用0.5%BSA的培养液,下室用5%血清的培养液,下室血清的浓度可根据细胞类型的不同进行调整,如果细胞侵袭能力强,可适当降低血清浓度,否则可适当提高血清浓度。需要注意的是:1。上室内的细胞数目要适当,过多,穿过膜的细胞会过多过快,如果用计数法的话将难以计数;最
