聚焦过程中出现的问题及解决办法(共5页).docx

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精选优质文档-倾情为你奉上聚焦过程中出现的问题及解决办法一、 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦不论在制胶、电泳和染色过程中都比常规聚丙烯酰胺凝胶电泳和SDS电泳有较多的技术问题需要解决,如制胶不易聚合,电泳时易烧胶,脱色时背景不易脱净等。但是只要掌握等电聚焦技术的原理,就能解决这些问题而得到高分辨和满意的结果。1. 凝胶聚合不佳,胶软,粘1) 系统中使用的试剂和水不纯(应该用双蒸水配制溶液)。2) 系统中有醇、巯基化合物或灰尘影响聚合。3) 凝胶浓度和关联度太低(有时是由于丙烯酰胺或甲叉双丙烯酰胺溶解不佳造成的)。4) 过硫酸铵(粉末或溶液)和TEMED保存期太长,不能起催化作用。5) 贮液保存期太长,抽气不充分。6) 聚合时温度太低,最好在3040聚合。7) 如用核黄素催化的光聚合,应使用近紫外的光源,如荧光灯,不要用钨灯泡,并采用尽可能薄的玻璃,不要用塑料板。8) 核黄素在碱性pH范围不能催化光聚合。2. 接通电源后没有电流,电流太低或电流随电泳增加1) 如果接通电源后没有电流,也没有电压,应检查外

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