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实验一 底物浓度对酶促反应的影响一、 实验目的掌握底物浓度对酶活性的影响，了解碱性磷酸酶（Alkaline Phosphatase, AKP）的Km值的测定原理和方法，理解Km值的意义。二、实验原理在温度、pH及酶浓度等恒定的条件下，底物浓度对酶的催化作用有很大的影响。当底物浓度较低时，酶促反应速度V随底物浓度S的增高而显著加快，随着底物浓度渐高，反应速度加快程度渐小，当底物浓度增加到一定程度以上时，再增高底物浓度，反应速度亦不再增加，成为该条件下极限最大反应速度Vmax。底物浓度与反应速度的这种关系可以用下列米曼（Michaclis-Menten）氏方程式表示。V=或Km=S( 1)式中，Km为米氏常数。当V=Vmax/2时，则Km=S，即米氏常数是反应速度等于最大速度一半时底物物浓度的数值。如图所示： VVmax Km S图1 底物浓度与酶促反应