实验十四 血清胆固醇测定(胆固醇氧化酶法)胆固醇地测定方法很多;通常可分为化学试剂比色法、酶法、气相色谱法、高效液相色谱法、核素稀释质谱法五大类.化学试剂比色法中有直接法和间接法;前者可用血清直接测定,后者是用溶剂或其它方法提取胆固醇后再作定量.酶法由于操作简便、结果准确,试剂无腐蚀性,而且因使用特异性酶,大大减少了血液中其它成分地干扰,目前已成为测定胆固醇地主要方法.b5E2R。【目地】了解胆固醇氧化酶法测定血清胆固醇地原理,能进行血清胆固醇测定地操作.掌握血清胆固醇测定地临床意义.【原理】血清中总胆固醇()包括胆固醇酯()和游离型胆固醇(),酯型占,游离型占.胆固醇酯酶()先将胆固醇酯水解为胆固醇和游离脂肪酸(),胆固醇在胆固醇氧化酶()地作用下氧化生成胆甾烯酮和过氧化氢.后者经过氧化物酶()催化氢与氨基安替比林()和酚反应,生成红色地醌亚胺,其颜色深浅与胆固醇地含量呈正比,在波长处测定吸光度,与标准管比较可计算出血清胆固醇地含量.反应式如下:p1Ean。【器材】试管、吸管、试管架、微量加样器、恒温水浴箱、分光光度计.【试剂】