血清尿素氮的测定一.实验原理血清中尿素在氨基硫脲存在下,与二乙酰一肟在强酸溶液中共煮时,可生成双乙酰和尿素形成的红色复合物(二嗪衍生物),其颜色深浅与尿素含量成正比,与同样处理的尿素标准液比色。即可求得血清中尿素的含量。 由于反应在强酸中进行,所产生的羟胺是干挠物质,所以必须用氧化剂将其氧化除去。 在呈色反应中产生的有色复合物对光不稳定加入氨基硫脲可增加其稳定性,还可提高尿素与双乙酰反应的灵敏度。二.实验操作取试管3支,注明空白管、标准管、测定管,按下表操作 管 试 号 剂测定管标准管空白管 血清(ml)0.02 尿素氮标准应用液(ml)0.02 蒸馏水(ml)0.02 二乙酰一肟试剂(ml)0.50.50.5 尿素氮试剂(ml) 5.05.05.0混匀后置沸水浴中煮沸12分钟,取出在冷水中冷却5分钟,分光光度计
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