实验 双缩脲法测定蛋白质浓度实验目的1. 学习蛋白质含量测定的原理和方法2. 掌握双缩脲法测定蛋白质含量的方法蛋白质含量测定的原理和方法微量凯氏定氮法 被测的天然含氮化合物与浓硫酸共热时分解出氨,氨与硫酸反应生成硫酸铵。在凯氏定氮仪中加入强碱消化液,使硫酸铵分解出氨。用水蒸汽蒸馏法将氨蒸入无机酸溶液中,然后再用标准酸溶液进行滴定,滴定所用无机酸的量(mol) 相当于被测样品中氨的量(mol) ,根据所测得的氨量即可计算样品的含氮量。 因为蛋白质含氮量通常在16 % 左右,所以将凯氏定氮法测得的含氮量乘上系数6.25 ,便得到该样品的蛋白质含量。 消化CO2+SO2+H2O+NH3 + 浓H2SO4NNH3+H2SO4(NH4)2SO4蒸馏H2O+Na2SO4+NH3(NH4)2SO4+NaOH吸收NH3+H3BO3NH4HB4O7+H2O滴定NH4HB4O7+HCl+H2O NH4Cl+H3BO3氮的总量测定凯氏定氮法原 理 : 当 脲 加 热 至180oC 时 , 两 分 子 脲 缩 合 , 放 出 一 分 子 氨 而形 成 双 缩 脲 。 双 缩 脲 在 碱 性 条 件 下 能 与