免疫组化染色操作顺序文件编码(GHTUUITID-GGBKT-POIU-WUUI8968)免疫组织化学染色原理和操作步骤一、免疫组织化学原理免疫组织化学(IHC)又称免疫细胞化学,是根据抗原一抗体特异性结合的原理,应用 带有可见标记的特异性抗体作为探针,检测组织和细胞中抗原性物质的一种技术。免疫组 化技术主要有直接法和间接法:直接法是以标记的一抗卿育标本以检测其中的抗原成分; 间接法则先后加入一抗和二抗,形成抗原一一抗一二抗复合体以达到检测该抗原的目的, 该法因二抗的放大作用而具有较高的敏感性。间接法常用的有过氧化物酶一抗过氧化物酶 (PAP)法、亲和素一生物素一过氧化物酶(ABC)法和链零亲和素一过氧化物酶(SP) 法。PAP法一抗和二抗均不标记,避免了标记过程对抗体活性的影响,但需要制备过氧化 物酶的抗体,与适量过氧化物酶混合形成PAP复合物(含3个酶分子和2个抗体分子), 染色时依次加入一抗、二抗、PAP复合物孵育标本,最后用H:0:和二氨基联苯(DAB)为底 物显示过氧化物酶,即可检测标本中的抗原成分。生物素为含硫的杂环单竣酸,可通过其竣基与蛋白质中