1、 学 士 学 位 论 文 系 别： 生 命 科 学 系 学科专业： 园 林 姓 名： 梁 彬 锋 运 城 学 院 2014 年 6月 水杨酸对月季切花保鲜作用的研究 系 别： 生 命 科 学 系 学科专业： 园 林 姓 名： 梁 彬 锋 指导教师： 杨 青 珍 运 城 学 院 2014 年 6月 水杨酸对月季切花保鲜作用的研究 梁彬锋 （运城学院生命科学系，山西运城， 044000） 摘 要 ： 为了探索月季切花瓶插期间的保鲜机理，本研究以月季花为材料，通过10mg/L、 30mg/L、 50mg/L不同浓度水杨酸溶液对瓶插月季花进行喷洒处理，研究月季切花瓶插过程中的衰老机理。结果表明：水杨酸
2、能显著延长切花瓶插观赏时间；减缓月季切花的水分亏缺，维持其水分平衡；减轻瓶插期间细胞膜损伤，平衡细胞膜透性；保护切花组织内的 SOD酶和 CAT酶活性，减缓膜脂过氧化程度。其中 30mg/L水杨酸溶液处理后的月季切花，寿命最长，保鲜效果最好。 关键词 ： 水杨酸；月季切花；保鲜 Salicylic acid Preservation of Cut Rose research Liang Binfeng （ Department of Life Science, Yuncheng University, Yuncheng, Shanxi, 044000） Abstract:In order to
3、 explore the mechanism of preservation of chinese rose during the vase planting, this study chinese rose as material, through 10 mg/L, 30 mg/L, 50 mg/L of different concentrations of salicylic acid in solution spray bottle inserts chinese rose, and study the aging mechanism in the process of vase pl
4、anting chinese rose.The results showed that salicylic acid could significantly prolong vase planting ornamental;Reduce the water deficit of chinese rose cut flowers, maintain moisture balance;Lighten the vase during cell membrane damage, balance the cell membrane permeability;Protect the SOD and CAT
5、 enzyme activity in the organization of cut, slow down the level of membrane lipid peroxidation.30 mg/L salicylic acid solution after processing of chinese rose cut flowers, life expectancy, preservation effect is best. Key words:Salicylic acid; Cut Rose; Preservation 目 录 1 前 言 - 1 1.1 月季的概述 - 1 1.1
6、.1 月季的形态特征 - 1 1.1.2 月季的主要价值 - 1 1.2 国内外研究进展及趋势 - 1 1.2.1 切花体内的水平衡与鲜切花衰老的关系 - 2 1.2.2 膜脂过氧化与鲜切花衰老的关系 - 2 1.2.3 酶活性与鲜切花衰老的关系 - 2 1.2.4 脯氨酸与鲜切花衰老的关系 - 2 1.3 研究的目的和意义 - 2 1.4 本课题的创新之处 - 3 2 材料与方法 - 4 2.1 试验材料 - 4 2.2 主要仪器和试剂 - 4 2.3 试验方法与内容 - 4 2.3.1 试验 前期处理 - 4 2.3.2 试验方法 - 4 2.3.3 切花瓶插寿命及外观品质的观察 - 5
7、2.3.4 细胞膜相对透性测定 - 5 2.3.5 游离脯氨酸的测定 - 5 2.3.6 丙二醛的测定 - 5 2.3.7 叶绿素的测定 - 5 2.3.8 SOD活性的测定 - 6 2.3.9 CAT 活性的测定 - 6 3 结果与分析 - 7 3.1不同浓度的水杨酸对月季切花瓶插寿命及品质的影响 - 7 3.2不同浓度的水杨酸对月季切花花朵大小变化的影响 - 7 3.3 不同浓度的水杨酸对月季切花花枝鲜重的影响 - 8 3.4不同浓度的水杨酸对月季切花丙二醛含量的影响 - 8 3.5不同浓度的水杨酸对月季切花瓶插期间膜透性的影响 - 9 3.6不同浓度的水杨酸对月 季切花游离脯氨酸含量的影
8、响 - 9 3.7不同浓度的水杨酸对月季切花叶片内叶绿素含量的影响 -10 3.8不同浓度的水杨酸对月季切花 花瓣内 SOD活性 的影响 -10 3.9不同浓度的水杨酸对月季切花 花瓣内 CAT活性 的影响 - 11 4 讨 论 -12 5 结 论 -13 参考文献 -14 致 谢 -15 1 1 前 言 1.1 月季 的概述 1.1.1 月季的形态特征 月季（ Rosa Chinensis）又称 斗雪红 、 长春花 。月季姿态优美、芳香馥郁、四季常开，深受人们的喜爱，是中国十大名花之一。月季，又被称为花中皇后 ,属于 蔷薇科 ， 蔷薇属 ，常绿小 灌木 ， 1-2 米。茎直立；小枝绿色，无毛
9、，常弯曲的刺或无刺。羽状复叶，叶片先端急尖或渐尖，基部圆形或宽楔形，边缘具尖锐细锯齿，表面鲜绿色，两面均无毛。月季花常数朵 簇生 或 单生 ，四季开花花朵多红色偶尔出现白色 花托 近球形， 萼 裂片三角状卵形，先端尾尖，全缘或羽状分裂 ； 花瓣 重瓣，以深红色、粉红色为主，少有白色。月季果实球形，黄红 色，直径 1.5-2 厘米。可作为观赏植物，也可作为药用植物。 目前广泛种植的月季和它的祖先月季（ Rose Chinensis）的区别是非常大的，所以我们称之为现代月季，也直接叫月季。它可以用来作为鲜切花生产、花园种植和盆栽，在花卉园艺中占有重要的地位。 1.1.2 月季的主要价值 月季常应用
10、于园林中布置花坛、花境，同时也可制作月季盆景，作花篮、切花、花束也是很好的选择。月季是鲜切花的一种重要花卉。 景观作用：在园林里，月季花具有不可替代的景观价值。月季是春夏季重要的观赏花，它的花期比较长，具有较高 的观赏价值，受全国各地园林工作者的喜爱。 环境保护：可作连续的鲜花花环、花坪、花墙，主要用于学校、住宅区、城市广场，等。 1.2 国内外研究进展及趋势 鲜花的需求大量增加意味着社会的发展和人类的进步，是人们生活水平和情调进步的重要标志，鲜切花就是其中之一 1。然而，美中不足的是花不能长时间保持其风景，花剪几天自然会枯萎，这给花卉产品储存，运输，销售等环节带来了许多不便。据统计，国内外的
11、鲜切花损失率约占总产量的 20% ，比一般的蔬菜水果的损失率要高的多 2。所以，很多研究者纷纷对此展开了研究，但 国内鲜切花生产起步较晚，对现有的研究结果的分析、探讨，对鲜切花卉市场具有深远的意义 3。 2 1949，比利时化学家鲍斯将一些化学物质加入水中，发现能明显延长鲜切花寿命。许多国家是鲜花的种植、交易和消费大国 4；这些国家对于花卉保鲜方面研究时间久 56，每年都会有新的保鲜剂配方涌现 7。 查阅国内外的研究资料，总结了出了切花衰老的机理主要有以下几方面 : 1.2.1 切花体内的水平衡与鲜切花衰老的关系 失水是切花衰老的主要原因 ,鲜切花脱离母体后，切花体内水平衡被破坏 ,出现萎蔫现
12、象 ,到最后花瓣 干枯和皱缩。因此 ,防止失水是切花保鲜的重要措施。此外 ,细菌、真菌、酵母菌等的繁殖会造成木质部阻塞 ,使传导能力逐渐降低进一步激化切花的衰老。 1.2.2 膜脂过氧化与鲜切花衰老的关系 切花在衰老过程中 ,细胞膜的透性增加。用来衡量膜脂过氧化及细胞膜透性的指标分别是丙二醛 (MDA)含量和相对电导率。细胞膜透性增加造成细胞内含物流出和细胞间隙中渗出物增加 ,加剧了水分的丧失 ,从而加剧了切花的衰老。 1.2.3 酶活性与鲜切花衰老的关系 酶的活性变化与切花衰老密切相关。 SOD是与活性氧代谢密切相关的酶类， SOD活性与植物抗氧化胁迫能力呈正相关，在切花衰老过程中 SOD的
13、活性均呈先升后降的趋势。 CAT活性的变化和 SOD有着相似先升后降的趋势。 1.2.4 脯氨酸与鲜切花衰老的关系 脯氨酸是植物体内的一种重要渗透调节物质，渗透调节是植物适应水分亏缺的主要生理机制之一。脯氨酸在植物体内的含量在很大程度上能反映出植物抗逆性的强弱。 1.3 研究的目的和意义 在国内外花卉产业中，鲜切花所占比例越来越大。随着社会文明的进步，生活水平、文化的提高，越来越多的人开始用鲜花表达自己的情感，促使鲜切花消费量逐年增加 。鲜切花行业又被称为朝阳产业。 随着我国切花生产的迅速发展，切花栽培与保鲜技术的研究对国内的花卉产业越来越显得重要。而目前国内鲜切花行业使用的一些保鲜剂，价格比
14、较高，对环境有一定的污染，效果不理想。大多还是以进口国外的保鲜剂为主，这样无疑就加大了鲜切花的成本。鲜切花的损耗大，保鲜剂价格高，都在抑制着鲜切花行业的发展。因此能研究制造出一种高效低价的鲜切花保鲜剂对国内鲜切花行业尤为重要。 据相关资料报道，水杨酸具有提高植物组织内的抗氧化酶活性，减缓膜脂过氧化，维3 持组织内的水分平衡的作用。目前水杨酸在菊花 8、 香石竹 9等花卉上具有很好的保鲜效果。但在月季上尚无报道。因此我们用水杨酸溶液对月季切花进行喷洒处理，对水杨酸对月季切花的保鲜机理展开了研究。 通过研究水杨酸对月季切花瓶插期间的保鲜机理，可以给国内的月季切花保鲜领域提供一定的理论依据和技术支持
15、。有助于提高国内的鲜切花保鲜技术，促进鲜切花行业的发展。 1.4 本课题的创新之处 这几年，水杨酸对于植物和水果的应用的研究以耐热性、抗病性和抑制乙烯等方面，然而对水杨酸在月季切花的保鲜方面的研究甚少。本试验通过水杨酸对月季切花保鲜机理进行研究。一方面为月季花 卉保鲜提供了一定的理论依据；其次为如何延长月季切花的瓶插保鲜时间提供了技术支持；最后也可以为花卉的生产者、经营者提高一定的效益。 4 2 材料与方法 2.1 试验材料 月季切花购于运城市西花园花鸟市场，选取蕾期切花，挑选大小相近，无病虫害和机械损伤的鲜切花作为试验对象 。 2.2 主要仪器和试剂 仪器： 722型可见分光光度计 ,DDS
16、-11A型电导率仪， 1250.02mm游标卡尺，电子天平 ,电热恒温水浴锅，离心机，紫外可见分光光度计，高速冷冻离心机，移液枪 试剂：盐酸、乙醇、 丙酮、 NaH2PO2H2O、 Na2HPO12H2O 、核黄素、甲硫氨酸、 8-羟基喹啉、柠檬酸、蔗糖 2.3 试验方法与内容 2.3.1 试验前期处理 将月季切花在蒸馏水中用枝剪进行修剪，将花枝剪成 35cm 左右，保留顶端两片叶子待用。 配置营养液： 3%的蔗糖 +150mg/L的 8-羟基喹啉 +300mg/L的柠檬酸 配置三个水杨酸溶液浓度梯度： 10mg/L、 30mg/L、 50mg/L 配制储备液 A：称取 15.6 g NaH2
17、PO42H2O 加入烧杯中用蒸馏水溶解，用 500 mL容量瓶定容。配制储备液 B：称取 35.85 g Na2HPO412H2 O 加入烧杯中用蒸馏水溶解，用 500 mL容量瓶定容。分别取 A液 8.5 mL和 B液 91.5 mL，用 300 mL蒸馏水充分混匀后即为0.05 molL 磷酸缓冲液 (pH值 7.8，含 0.1 mmolL EDTA)。 配制 NBT (氯化硝基四氮唑蓝 )反应液。称取 0.01204 g核黄素溶于 100 mL蒸馏水中，取 4 mL，称取 0.387 g甲硫氨酸， 0.0103 g NBT，加入磷酸盐缓冲液 (PH值 7.8) 196 mL溶解。 2.3
18、.2 试验方法 设 4个试验： CK： 蒸馏水喷洒花朵 SA 1 10mg/L 水杨酸溶液喷洒花朵 SA 2 30mg/L 水杨酸溶液喷洒花朵 5 SA 3 50mg/L 水杨酸溶液喷洒花朵 每个试验插 10朵花，在瓶内倒入 200mL 提前配置好的营养液，用棉花将瓶口塞住，其中 2 朵切花用作外观形态指标的观察，另外 8 朵用作生理指标的测定，将 4 个实验组放置于室内，避免太阳光照 射，室温维持在 20 左右，每天早上 8点对各个试验组喷洒相对应的溶液，每个实验重复三次。 2.3.3 切花瓶插寿命及外观品质的观察 月季切花瓶插寿命的计算是从瓶插第一天至花朵出现萎焉、茎出现弯曲、花瓣变蓝从而
19、失去观赏价值为止。花朵直径变化用游标卡尺测量，计算平均单枝花的直径大小。花鲜重用电子天平称重法称取花重 , 计算单枝平均鲜重。 2.3.4 细胞膜相对透性测定 参照张昭其 10的方法测定，每组取 1g花瓣置于试管中，加入 20mL蒸馏水摇匀后浸泡 4h，用 DDS-11A 型电导率仪测定电导率（ A） ,然后放在沸水浴中 15min，冷却至室温后测定的电导率（ B），相对透性 =（ A/B） *100%计算。 2.3.5 游离脯氨酸的测定 采用磺基水杨酸法 11测定。称取各实验组花瓣 0.5g，剪碎倒入试管中，加入 5mL 3的磺基水杨酸溶液，沸水浴 10min（加热过程中不断摇晃），冷却后过
20、滤，滤液就是花瓣内的脯氨酸的提取液。取 2 mL提取液于试管中，加入冰醋酸 2 mL及 2.5酸性茚三酮试剂2 mL ，沸水浴加热 30min。冷却，加入 4 mL甲苯，放入 10 ml规格的离心管中，在 3000r/min下离心 5min。吸取上层溶液于比色皿中，甲苯为对照，在波长 520mm处测定吸光度（ A）值，并记录。 2.3.6 丙二醛的测定 用硫代巴比妥酸法测定丙二醛 12。取 0.500 g样品，与 5 mL 5% 三氯乙酸研磨，匀浆离心 10 min，速度 3000 r/min。取 2 mL上清液，加入 0.67% 硫代巴比妥酸 2 mL，混合后在沸水浴 30 min，冷却后 3000 r/min离心 10 min。取 上清液测定在 450 nm、 532 nm和 600 nm处吸光度值并记录。 2.3.7 叶绿素的测定 丙酮与 95%浓度的乙醇等体积混合，待测叶片用蒸馏水洗净，用打孔器在主脉两侧各取 5个小圆片放入 20ml提取液，置于暗处浸泡 8-12h，期间摇晃 2-3次，直至叶片变白为止。将上层绿色溶液注入比色皿，蒸馏水为参比溶液，在 652nm 测量的 D 值，来表示叶
