真核基因组 DNA提取2022/5/23教学内容 真核生物基因组的结构及特点、人类基因组计划 真核基因组提取的实验原理、操作说明、仪器使用及注意事项 基因组提取后的应用：基因组文库、PCR及southern blot RNA提取方法简介 核酸（DNA和RNA）定量及定性方法的介绍2022/5/23实验目的 熟悉真核DNA提取的方法和原理 掌握真核生物基因组的结构及特点l 分离纯化核酸总的原则：应保证核酸一级结构的完整性；排除其它分子的污染（蛋白质、脂类、糖、有机溶剂、金属离子、外源DNA、RNA等） 。l 核酸纯化应达到的要求：核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子；其它生物大分子的污染应降低到最低程度；排除其它核酸分子的污染。核酸制备的一般原则尽量简化操作步骤，缩短提取过程。减少化学因素对核酸的降解（如过量酸碱） 减少物理因素对核酸的降解：机械剪切力（强烈震荡、渗透压急剧改变、反复冻融）和高温防止核酸的生物降解（核酸酶的预防） 。 核酸制备时应注意的事项:l 核酸制备的步骤：破碎细胞 破碎细胞提取 提取纯化 纯化I. 材料准备II. 破碎细胞或包膜内容物释放I
