等温滴定量热法(共5页).docx

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精选优质文档-倾情为你奉上等温滴定量热法(ITC)的简易操作流程: 样品的准备,包括滴定物与被滴定物(如DNA滴定蛋白质)。a. 实验前的蛋白质样品需用缓冲溶液透析(注意透析袋的正确使用),透析时间一般为24小时,buffer体积为1L,且中途注意更换buffer,其目的是为了减少由于溶液组成不同而产生的滴定误差;b. 样品的浓度要求,一般要求的浓度为微摩尔级,且滴定物(DNA)的浓度是被滴定物(蛋白质)的十倍左右为宜,且实验前需要再次确认所配样品的浓度是否符合要求;c. 在进行滴定实验前,用于空白对照的缓冲液,蛋白样品以及DNA均需抽真空除气泡(15Mins左右为宜)。 仪器的清洗。a. 在进行真空除气泡前,除气泡用容器均需用超纯水清洗三次左右,且清洗完毕后擦干内壁,防止由于残留缓冲液的稀释而导致样品浓度的改变;b. 样品池(sample cell)的清洗,用超纯水清洗15次左右(每次2ml左右),清洗完毕后,一定要将残留的超纯水吸干净;c. 注射器(syringe)的清洗,用超纯水清洗3次以上(专用注射器清洗,此时无需点击open,

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