2010食品生物技术实验-基因工程(共5页).doc

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精选优质文档-倾情为你奉上实验一、实验二 动物组织DNA的提取及核酸浓度的测定一实验目的1. 掌握DNA的提取原理和方法;2. 学习紫外线(UV)吸收法测定核酸浓度的原理。二实验原理1. CTAB法提取动物组织DNA:CTAB法原理:CTAB(十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸的特性。在高离子强度的溶液中(0.7mol/L NaCl),CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物,只是不能沉淀核酸。通过有机溶剂抽提,去除蛋白,多糖,酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。2. 紫外吸收法测定核酸的含量和纯度: 组成核酸分子的碱基,均有一定的吸收紫外线特征,最大吸收值在波长为250-270nm之间。例如,腺嘌呤的最大紫外线吸收值在260.5nm,胞嘧啶为267nm, 鸟嘌呤为276nm,胸腺嘧啶为264.5nm,尿嘧啶为259nm。这些碱基与戊糖,磷酸形成核苷酸后,其最大吸收峰不会改变,但核酸的最大吸收波长是260nm,吸收低谷在230nm。这个物理特性为确定核酸溶液浓度提供了基础。在波长260nm

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