精选优质文档-倾情为你奉上多酚氧化酶活性测定一、引言食品的褐变主要分为酶促褐变和非酶褐变,多酚氧化酶是引起果蔬褐变的主要酶之一,学习它的活性测定对于果蔬加工采取合理的护色措施具有指导意义。多酚氧化酶的活性测定有多种方法,出于一般实验室的条件相对不是很先进,本试验选用了一种较简单的方法,但这种方法仍然可以训练学生掌握测定酶活性的基本要点和技能。二、原理邻苯二酚在多酚氧化酶催化下受O2作用生成邻苯二醌,邻苯二醌能够被抗坏血酸还原,如抗坏血酸充足,少量邻苯二酚可反复不断地发生氧化还原。由于该酶最适pH为6,因此这一过程在pH6时最快。 把分析对象配成pH6左右的样液,在抗坏血酸和邻苯二酚存在时,于20下振荡2min,这时抗坏血酸被氧化。精确的经过2min后加入偏磷酸以终止反应。用碘量法(以碘酸钾为基准试剂)进行滴定,测得剩余的抗坏血酸。由得到的数据求出被氧化的抗坏血酸量,并计算出酶活性,并以1g分析物质1min内氧化抗坏血酸的微克分子数表示之。所有上述过程的主要反应式如下: 酶邻苯二酚 邻苯二醌邻苯二醌