精选优质文档-倾情为你奉上蛋白印迹操作流程蛋白印迹，也称Western，Westernblot、Westernblotting、Western印迹，简称WB，是用免疫学方法检测蛋白，研究蛋白质的表达调控的重要方法之一。蛋白印迹可以参考如下步骤进行操作。 1.蛋白样品的制备(Proteinsamplepreparation) 可以选用适当的裂解液，如赛驰生产的WIP细胞裂解液，裂解贴壁细胞、悬浮细胞或组织样品。对于某些特定的亚细胞组份蛋白，例如细胞核蛋白、细胞浆蛋白、线粒体蛋白等，可以参考相关文献提取这些亚细胞组份蛋白，也可以使用试剂盒进行抽提，如赛驰生产的细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒。 为确保每个蛋白样品的上样量一致，收集的蛋白样品均应测定其蛋白浓度。蛋白浓度的测定方法，应根据组织细胞裂解或匀浆所使用的方法及裂解液的不同选用，因为去垢剂和还原剂等对不同蛋白浓度测定方法的影响差别很大。如使用我公司生产的WIP细胞裂解液，可以使用BCA蛋白浓度测定试剂盒。 2.电泳(Electrophoresis) (1)SDS-P
