1、实验六实验六猪丹毒杆菌检验猪丹毒杆菌检验一、实验目的一、实验目的n 1、学习掌握猪丹毒杆菌检验的基本原理和方法;、学习掌握猪丹毒杆菌检验的基本原理和方法;n 2、了解检验猪丹毒杆菌的意义。、了解检验猪丹毒杆菌的意义。二、实验说明二、实验说明猪丹毒猪丹毒 (Swine erysipelas)是由猪丹毒杆菌是由猪丹毒杆菌 (Erysipelothrix rhusiopathiae)引起的一种人畜共患传染病,其主要特征引起的一种人畜共患传染病,其主要特征为高热、急性败血症、皮肤疹块、慢性疣状心内膜炎及为高热、急性败血症、皮肤疹块、慢性疣状心内膜炎及皮肤坏死与多发性非化脓性关节炎。皮肤坏死与多发性非化
2、脓性关节炎。猪丹毒杆菌分为两个种,即红斑丹毒丝菌和扁桃体丹猪丹毒杆菌分为两个种,即红斑丹毒丝菌和扁桃体丹毒丝菌,其中仅红斑丹毒丝菌是具有致病力的毒力种,毒丝菌,其中仅红斑丹毒丝菌是具有致病力的毒力种,对猪最易感并有很强的致病性,至今已发现对猪最易感并有很强的致病性,至今已发现 la, 1b, 2-24和和 N型共型共 26个血清型,大约个血清型,大约 80% 以上的猪源性分离株属以上的猪源性分离株属 1型型 (la和和 1b)和和 2型,型, 我国优势血清型也为我国优势血清型也为 1a, 1b和和 2型。型。“大红袍大红袍 ”类丹毒类丹毒 不规则鲜红色斑块不规则鲜红色斑块 大紫肾大紫肾 :典型
3、的败血脾:典型的败血脾 ;肾淤肾淤血、肿大血、肿大 心瓣膜增生心瓣膜增生 :疵状心内膜炎的病变,:疵状心内膜炎的病变,二尖瓣二尖瓣 和和 主动脉瓣主动脉瓣 出现菜花样增生物出现菜花样增生物 脾充血肿大脾充血肿大 三、检验程序三、检验程序四、操作步骤四、操作步骤(一)增菌(一)增菌 以无菌操作取检样,用乳钵加灭菌砂磨碎,无菌操作将样以无菌操作取检样,用乳钵加灭菌砂磨碎,无菌操作将样品转至营养肉汤中,于品转至营养肉汤中,于 36 士士 1 培养培养 8 h10h。(二)分离和培养(二)分离和培养对没有受污染的新鲜病料可直接接种在血液琼脂或血清琼对没有受污染的新鲜病料可直接接种在血液琼脂或血清琼脂培
4、养基上,脂培养基上, 37 培养培养 24 48h。或经。或经 TSB肉汤肉汤 37 培养培养24h后,再转种于血液琼脂或血清琼脂培养基上,后,再转种于血液琼脂或血清琼脂培养基上, 37 培培养养 24h。血清琼脂血清琼脂 :菌落特:菌落特征:细小、圆形、征:细小、圆形、透明、凸起、灰白透明、凸起、灰白色、有光泽、质软色、有光泽、质软、露珠样、易混悬、露珠样、易混悬于盐水中。于盐水中。血液琼脂血液琼脂 :菌落形态同血清琼脂,此外形成绿色的狭窄溶血:菌落形态同血清琼脂,此外形成绿色的狭窄溶血环(环( 溶血)溶血) TSB肉汤肉汤 :轻度:轻度混浊,振动试管混浊,振动试管呈现出云雾状,呈现出云雾状,类似试管刷,有类似试管刷,有少量灰白色粘稠少量灰白色粘稠沉淀,不形成菌沉淀,不形成菌膜和菌环。膜和菌环。