POD 测定方法.docx

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资源描述

植物体POD的测定探原理了解过氧化氢酶活性测定的几种方法,掌握用愈创木酚法分别测定过氧化氢酶和过氧化物酶的活性。过氧化物酶广泛颁布于植物的各个组织器官中。在有过氧化氢存在下,过氧化物酶能使愈创木酚氧化,生成茶褐色物质,可用分光光度计测量生成物的含量。实验材料、试剂与仪器设备1、实验仪器722型分光光度计、离心机、秒表、电子天平、研钵2、实验试剂愈创木酚、30%过氧化氢、20mmol/LKH2PO4、100mmol/L磷酸缓冲液(pH6.0)、反应混合液】100mmol/L磷酸缓冲液(pH6.0)50mL,加入愈创木酚28uL,加热搅拌,直至愈创木酚溶解,待溶液冷却后,加入30%过氧化氢19uL,混合均匀保存于冰箱中3、实验材料任何植物材料探实验步骤1、粗酶液的提取称取植物(小麦叶片)材料0.1g,加20mmol/LKH2PO45mL,于研钵中研磨成匀浆,以10000r/min离心10分钟,收集上清液保存在冷处,所得残渣再用20mmol/LKH2PO45mL溶液提取一次,全并两次上清液。2、酶活性的测定取比色皿2只,于一只中加入反应

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