中国药典-高效液相色谱剖析.ppt

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1、中国药典高效液相色谱1定义高效液相色谱法 系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱,对供试品进行分离测定的色谱方法。注入的供试品,由流动相带入柱内,各组分在柱内被分离,并依次进入检测器,由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号。2一、对仪器的一般要求和色谱条件 所用的仪器为高效液相色谱仪。仪器应定期检定并符合有关规定3仪器包括:储液器泵进样器色谱柱 检测器色谱柱 反相色谱系统使用非极性填充剂,常用的色谱柱填充剂为化学键合硅胶,以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用,辛基硅烷键合硅胶和其他类型的硅烷键合硅胶也有使用。 正相色谱系统使用极性填充剂,常用的填充剂有硅胶等。 离子交换色谱系统使用离

2、子交换填充剂;分子排阻色谱系统使用凝胶或高分子多孔微球等填充剂;对映异的分离 常使用 性填充剂。4色谱柱 填充剂的性 的 、 、孔 、 积、键合基 的 、 和键合类型等 以色谱柱的填充, 供试品的 行为和分离效 。分 分子 2000的化合应孔 在15nm以的填,分 分子 2000的化合应孔 在30nm以currency1的填。 分 柱的填充剂 一般在310m“。 2m 的填充剂常用 填装微 柱 内 2mm 。5注fi 以硅胶为 的键合fl定相的使用 常40,为 分离效 高色谱柱的使用 ,”60 流动相的PH应 在28的。PH 8,使 硅胶 ;PH 2,硅胶相的化学键合相。 色谱系统中使用PH

3、8的流动相,应用的填充剂, 采用高硅胶为 并 有高 的键合硅胶填充剂、有-化填充剂 使用PH 2的流动相,应用 的填充剂, 有 积 阻 用的 异 基或 异 基 十八烷基硅烷键合硅胶填充剂 6检测器 最常用的检测器为 检测器,包括 极 检测器、其他常的检测器有 检测器、 检测器、 检测器、 化学检测器和 谱检测器等。 、 、 化学检测器为性检测器,其 应 供试品 液的 有关,化合的 有关; 检测器和 检测器为 用型检测器,对所有的化合 有 应; 检测器对 类 的化合,其 应 供试品的 有关; 极 检测器以 记录供试品的 谱,用 供试品的 谱定和色谱 的 检 。7检测器 、 、 化学和 检测器的 应供试品 液的 在一定 内呈线性关系,” 检测器 应供试品 液的 常呈指数关系,进行计算,一般经对数转换。 的检测器,对流动相的要求 。 采用 检测器,所用流动相应符合 分 法 附录V A 项对 剂的要求;采用低波长检测,应考虑有相中有 剂的截止使用波长,并用色谱级有 剂。 检测器和 谱检测器 常允许使用 挥盐组分的流动相。8二极管阵列检测器(diode array detector,DAD)特点:在任一内, 得到 在 波长的情况,即三维图谱

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