1、 目 的 学习离体小肠平滑肌的制备和灌流。 观察小肠平滑肌的自律性收缩,理解其原理。 观察药物acetylcholine (Ach、乙酰胆碱),histamine (His、组胺),BaCl2分别对离体豚鼠回肠平滑肌的作用,并以atropine(阿托品)、chlorpheniramine(氯苯那敏、扑尔敏)为工具药,初步分析以上药物的作用原理。原 理(1) 胃肠平滑肌收缩的自动节律性(慢波理论:Cajal细胞的生电性钠泵活动的结果)。原 理(2) 乙酰胆碱:M胆碱能受体激动药。Ach与M受体结合,使平滑肌Ca2+通道开放,Ca2+内流,肌浆Ca2+,平滑肌收缩幅度增高。 阿托品:M胆碱能受体阻
2、断药。阿托品与平滑肌细胞膜M受体结合,阻断乙酰胆碱与M受体结合,阻断乙酰胆碱与M受体的激动作用。原 理(2) 组胺:激动平滑肌细胞膜H1受体,通过激活G蛋白-磷脂酶C系统,使细胞内Ca2+增高,导致平滑肌收缩。 扑尔敏:H1受体阻断药。扑尔敏与平滑肌细胞膜H1受体结合,阻断组胺与H1受体结合,从而阻断组胺对H1受体的激动作用。原 理(3)氯化钡:肌肉兴奋剂。Ba2+经钙通道进入胞浆,使肌浆Ba2+,平滑肌收缩幅度增高,但泵出障碍;另一方面BaCl2能兴奋胆碱能受体,使平滑肌收缩幅度增高。材 料 豚鼠1只:WT为300 g左右 麦氏浴槽,生物信号采集系统,张力换能器。 台氏液, 10-2 g/L
3、乙酰胆碱 、1 g/L硫酸阿托品、 10-2 g/L组胺, 10-3 g/L扑尔敏、10 g/L BaCl2 溶液。方 法1. 实验装置准备:打开恒温水浴37-加台氏液于麦氏浴槽中-95% O2+5%CO2持续通气(气泡一个个逸出为宜)。2. 标本准备:击昏豚鼠-开腹-减取回肠-冲洗内腔-截取肠段- 肠段两端对角穿线- 固 于麦氏浴槽 换能器 。3. 实验 :打开 置( 物对 体豚鼠回肠 )- 置- 换能器张力2 g - 10-30 ( 线 收缩幅度 ) 肠, 回 1cm ,取出回肠 10cm左右一段,置于 台氏液 中,冲洗,回肠 1-1.5cm currency1段。标本准备(1)标本准备(
4、2) 取一段肠“置于 台氏液 中, 两端对角 fi穿线,fl打 。一端系于浴槽固 ,另一端系 张力换能器 。换能器肠管观察项目 记录肠段基础张力,收缩张力,收缩频率。 加 10-2 g/L Ach 0.2ml,观察并记录 ,作用 换 。 以上Ach , 收缩 高 加 1 g/L阿托品 0.2ml,观察 , 换 , 基 , 加 的Ach,观察并记录收缩 ,换 。 加 10-2 g/L组胺 0.3ml,作用 换 。 加 10-2 g/L扑尔敏0.2 ml,5 min ( 换 )加 组胺,观察并记录收缩 ,换 。 加 10 g/L BaCl2 1ml, 作用 高 ,加 1 g/L阿托品 0.2 ml,观察并记录收缩 。