在整堂课的教学中,刘教师总是让学生带着问题来学习,而问题的设置具有一定的梯度,由浅入深,所提出的问题也很明确RNARNA提取及提取及Q-PCRQ-PCR相关技相关技术术主讲:宋志新在整堂课的教学中,刘教师总是让学生带着问题来学习,而问题的设置具有一定的梯度,由浅入深,所提出的问题也很明确利 用 含 有 变 性 剂 和Rnase 抑 制 剂 的 有 机 溶 剂 提 取RNA , 是目前常用的RNA 提取方法。Trizol (主要成分为异硫氰酸胍和酚),具有极强的裂解能力,可在短时间内裂解细胞和组织样本,保持样品中RNA 的完整性,有效抑制RNA 的降解。样品在TotalRNAExtractionReagent 中能够充分被裂解,在加入氯仿离心后,溶液会形成上清层、中间层和有机层( 鲜红色下层) ,RNA 分布在上层水相中,收集上清层后,经异丙醇沉淀便可以回收得到TotalRNA 。提取的总RNA 纯度高,基本不含蛋白质及基因组DNA ,提取的RNA 可直接用于Northern ,点杂交,mRNA 纯化,体外翻译,RT-PCR ,以及构建cDNA 文库等各种分子生物学实验。TotalRNA