免疫沉淀(Immunoprecipitation)实验操作方法实验原理:免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)是利用抗原和抗体的特异性结合以及细菌蛋白质如proteinA/G特异性地结合到免疫球蛋白(抗体)FC片段的现象而开发出来的特异分离富集抗原的方法。目前多用预先结合固化在Agarosebeads上的proteinA/G(Agrose-proteinA/G),使之与抗体结合,再通过抗体特异性结合抗原而形成Agrose-proteinA/G、抗体、抗原复合物,利用Agarosebeads的重量,通过离心即可特异分离富集目的抗原。CopyritKMolecularStationwoftern样品准畚1-样品预着先抗郎航原孵育況淙反应电泳分析实验步骤:1. 处理细胞:依据实验目的,设计实验,处理好细胞模型。一般3X106细胞/处理(即六孔板一个孔,约200ug总蛋白)。2. 配IP裂解液:200ul/孔(6孔板),并加入蛋白酶抑制剂,如果蛋白磷酸化水平影响实验结果则应加入磷酸酶抑制剂。注