实验原理随着分子生物学的迅速发展,细菌的分类鉴定从传统的表型、生理生化分类进入到各种基因型分类水平,如(G+C)mol%、DNA杂交、rDNA指纹图、质粒图谱和16SrDNA序列分析等。细菌中包括有三种核糖体RNA,分别为5SrRNA、16SrRNA、23SrRNA,rRNA基因由保守区和可变区组成。16SrRNA对应于基因组DNA上的一段基因序列称为16SrDNA。5SrRNA虽易分析,但核苷酸太少,仅几十bp,没有足够的遗传信息用于分类研究;23SrRNA含有的核苷酸数几乎是16SrRNA的两倍,分子量太大,分析较困难。而16SrRNA相对分子量在2kb左右,较为适合PCR扩增,又具有保守性和存在的普遍性等特点,序列变化与进化距离相适应,序列分析的重现性极高,因此,现在一般普遍采用16SrRNA作为序列分析对象对微生物进行测序分析。16SrRNA的编码基因是16SrDNA,但是要直接将16SrRNA提取出来很困难,因为易被广泛存在的RNase降解,因而利用16SrDNA鉴定细菌,其技术路线如下:PCR实验原理即聚合酶链式反应,是指在DNA聚合酶催化下