1、Replication and damage repair第二章 DNA的复制、损伤和修复第一节 DNA的复制(Replication, DNA biosynthesis)指DNA双链在细胞分裂以前进行的复制过程。哺乳动物的细胞周期(一)半保留复制DNA在复制时,以亲代DNA的每一股作模板,合成完全相同的两个双链子代DNA,每个子代DNA中都含有一股亲代DNA链,这种现象称为DNA的半保留复制(semi-conservative replication)。意义:半保留复制说明DNA在代谢上的稳定性。经过许多代的复制,DNA链仍可保持完整,这在生物的遗传上是十分重要的。一、DNA 复制特征 DN
2、A以半保留方式进行复制,是在1958年由M. Meselson 和 F. Stahl 所完成的实验所证明。该实验首先将大肠杆菌在含15N的培养基中培养约十五代,使其DNA中的碱基氮均转变为15N。将大肠杆菌移至只含14N的培养基中同步培养一代、二代、三代。分别提取DNA,作CsCl密度梯度离心 半保留复制证 (以原核生物 大肠杆菌为例) 原料: dNTP,Mg+ 双链DNA模板 引物(primer),常是RNA,有游离的 3OH。 引物酶(primase,DnaG),用于合成复制所必需的RNA引物 解螺旋酶 ( helicase ) , DnaB, 由DnaA和DnaC协助在复制的起始点(Or
3、i C)上解开双螺旋。与复制有关的酶和因子复制的起始点与方向代亲 DNA , 制起始点呈叉型移 链 复 动复制 亲代DNA 分子3535复制 (ori):DNA复制要 DNA分子的 定 , 称复制 :一个 ,约245bp, 的重复 :多个 oriE.coli复制 oriC 度为245bp, 两个 : 的 和 是 定和 制 currency1复制的一“。 ,每一个 都由fifl ,含fl和 ,有 , 制复制时 。重复序列,重复出现次,能与起始蛋白”fl特异结合,当”fl蛋白(约 种)结合于的个部位上时复制开始。 ”fl蛋白(一种专一的蛋白)和结合后,双螺旋解开形成复制叉。故”fl蛋白与启动解链有关 ”fl蛋白是起始的关键成分。大肠杆菌复制起点成串排列的重复序列GATCTNTTNTTT成 的三个13bp 有 有 TTATCCACADnaA合 个9bp DnaADnaB( )SSB大肠杆菌DNA复制 在 的 模基 进行复制的 称为复制子(replicon),每个复制子都含有 制复制 的 (origin),可 有 复制的 (terminus)。每个 生两个移动方 相 的复制 ,复制完成时,复制 相 合 。 上 两个相 的离定为一个复制子。(二)复制子