1、 细胞融合与红细胞膜渗透性观察一、实验原理细胞融合（cell fusion）又称细胞杂交（cell hybridization），是指两个或两个以上的细胞融合成一个细胞的现象。细胞融合术是细胞遗传学、细胞免疫学、病毒学、肿瘤学等研究的一重要手段，也是制备单克隆细胞株的重要技术。在诱导物（如仙台病毒，聚乙二醇）作用下，相互融合的细胞发生凝集，随后在质膜接触处发生质膜成份的一系列变化，主要是某些化学键的断裂与重排，最后打通两质膜，形成双核或多核细胞。细胞融合病毒是最早采用的融合剂。常用于诱导动物细胞融合的病毒有仙台病毒、新城鸡瘟病毒、疱疹病毒等，其中仙台病毒最常用。用作融合剂的病毒必须事先用 或
2、， 病毒的 性 病毒的融合 性。融合 ， 动物细胞 ， 仙台病毒 在鸡 中，currency1“ 仙台病毒，在 fifl 中融合 性， 制备fl 。 ，病毒”细胞后， 细胞的生 动生 。病毒诱导融合在 的动物细胞合中聚乙二醇，发生细胞凝集作用聚乙二醇诱导细胞融合的理， 。聚乙二醇是化学剂， 用 ，诱导细胞融合的 ， 是 有一毒性， 有些细胞如 细胞 用。聚乙二醇 诱导融合 的 融合技术，是两 细胞的合于交 中， 细胞聚集成， 后 ，以 细胞融合。 排列的细胞， ，细胞 被穿，生脂双层膜孔，导致细胞之间的细胞质连通，” 发生细胞融合。 融合技术有许多 ，如诱导细胞融合的 ， 细胞无毒害作用，操作
3、简 ，重复性好。 融合 融合仪1. 器具: 显微镜 离心 天平 离心管 细滴管 载片、盖片. 剂: 5 %聚乙二醇 称取一的 MW=4 放刻度管，在酒精灯火或沸水中热溶化。待冷至5 ，等体积预热至5 的 KN匀。Alsver 葡萄糖 . 5g 柠檬酸钠 . g NaCl .4 g，重蒸水至1 ml。KN NaCl g，KCl .4g，Na H O4. H O 1.77g，NaH O4. H O .69g，葡萄糖 g，酚红 . 1g，溶于1 ml重蒸水中。. 5%NaCl二、实验器材与剂1.用注射器取 ml Alsver，再从翼下静 取鸭血 ml，注管 ，再6ml Alsver，匀后4冰箱中备作
4、3 4用。. 实验取“1”1ml于离心管中，4ml . 5%的NaCl，匀平衡后以1 rpm离心5min。3. 去上 。再重复“ ”两次，最后一次离心1 min。4. 在沉血球中1ml KN，匀 之成为细胞悬。5. 在“4”中6 滴（约 .5ml）5 %的 ，迅速匀，常温下 3min滴片镜检。三、实验 及 法四、结果观察在 倍镜下以看有两个或两个以上的鸭血细胞膜融合在一，形成一个异核体细胞。要注意辨融合细胞与重 的鸭血细胞。、融合 的 在 倍镜下随 个细胞 融合的与 融合的细胞 ，以融合细胞 两个或两个以上的细胞核的细胞 的细胞核 以 细胞核 融合与 融合的细胞核 融合 。作 显微镜下细胞融合的变化， 融合 。细胞膜是细胞与 ” 物质交 的结 ， 性 某些物质” 细胞。 于 性质的物质，细胞膜的通透性有 。 细胞与 处的 fi在渗透 ，水 从渗透的一 的一 ，以至于在 渗 中，细胞 水 在渗 中，细胞水currency1至裂。一、实验原理红细胞膜渗透性观察
