利用16SrRNA基因序列分析进行微生物分类鉴定【实验目的】1. 了解微生物分子鉴定的原理和应用。2. 掌握利用16SrRNA基因进行微生物分子鉴定的操作方法。3. 运用软件构建系统发育树并对微生物进行系统发育关系分析。【实验原理】长期以来，对微生物的分类鉴定主要采用分离培养、形态特征、生化反应和免疫学等方法。但这些传统手段均存在耗时长、特异性差、敏感度低等问题，难以满足现代细菌学研究的发展要求。随着分子生物学技术的迅速发展，特别是聚合酶链式反应（PCR）技术的出现及核酸研究技术的不断完善，产生了许多新的分类方法，如质粒图谱、限制性片段长度多态性分析、PCR指纹图、RNA基因（即rDNA）指纹图、16S核糖体核糖核酸（ribosomalRNA，rRNA）序列分析等。这些技术主要是对细菌染色体或染色体外的DNA片段进行分析，从遗传进化的角度和分子水平进行细菌分类鉴定，从而使细菌分类更科学、更精确。其中原核生物16SrRNA基因（真核18SrRNA基因）序列分析技术已被广泛应用于微生物分类鉴定。核糖体rRNA对所有生物的生存都是必不可少的。其中16SrRNA在细
