十五章节细胞破碎.ppt

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1、1生物分离过程的一般流程原料液细胞分离(离心,过滤)细胞胞内产物 路线一 路线二细胞破碎碎片分离路线一A路线一B清液胞外产物粗分离( 盐析、萃取、超过滤等)纯化(层析、电泳)脱盐(凝胶过滤、超过滤)浓缩(超过滤)精制(结晶、干燥)包含体溶解(加盐酸胍、脲)复性原料液( )细胞胞内产物碎片分离盐析、萃取、超过滤等凝胶过滤、超过滤加盐酸胍、脲本章内容2常见的细胞壁结构细胞破碎技术包涵体的纯化方法本章的主要内容3概述不同类型的细胞分泌目标产物的类型: 动物细胞多分泌到细胞外培养液 植物细胞多为胞内产物 微生物(细菌/酵母/真菌)胞内、胞外对于胞内产物需要收集菌体或细胞进行破碎。 4概述大多数情况下,

2、抗生素,胞外酶,一些多糖,及氨基酸等目标产物存在于发酵液中。有些目标产物存在于生物体中。尤其是由基因工程菌产生的大多数蛋白质是在细胞内沉积。脂类物质和一些抗生素包含在生物体中。5概 述细胞破碎(cell rupture)技术是指利用外力破坏细胞膜和细胞壁,使细胞内物质包括目的产物成分释放出来的技术。细胞破碎技术是分离纯化细胞内合成的非分泌型生化物质(产品)的基础。为了研究细胞破碎,提高其破碎率,有必要了解各种微生物细胞壁的组成和结构。615.1 细胞壁结构对破碎的影响微生物细胞和植物细胞外层均为细胞壁,细胞壁里面是细胞膜,动物细胞没有细胞壁,仅有细胞膜。通常细胞壁较坚韧,细胞膜脆弱,易受渗透压

3、冲击而破碎,因此细胞破碎的阻力主要来自于细胞壁。不同细胞壁的结构和组成不完全相同,故细胞壁的机 不同,细胞破碎的 易程 不同。7细菌细胞壁结构 有细菌的细胞壁 是由 糖组成, 是 的 糖 相 糖 的 相 ,构成 细胞壁的 结构,包 在细胞 细胞 有一的 和 。8细菌细胞壁结构破碎细菌的主要阻力是来自于 糖的 结构,其 结构的程 和 于 糖 存在的 的数currency1和其 的程 。革兰氏阴性菌的细胞壁结构与革兰氏阳性菌有很大不同。 “ 菌型的生物是大fifl菌,通 细胞生产 多细胞组的产物。物 主 ”素 大fifl菌 糖 生素 大fifl菌 素 大fifl菌 细胞白 等9酵母细胞壁的结构示意图 里层是由 糖的细 组成, 构成 细胞壁的 , 细胞 有一的 , 面的是一层糖蛋白, 外层是 糖,由1 酸 成 。在层的内 ,有 糖酶的 物。破碎酵母细胞壁的阻力主要于壁结构 的 程和 的 。10真菌的细胞壁 真菌的细胞壁较 ,主要由多糖组成,其含有较currency1的蛋白质和脂类。 不同的真菌,细胞壁的组成有大的不同,其中大多数真菌的多糖壁是由 质和 糖构成,数含 素。 酵母和细菌的细胞壁一 ,真菌细胞壁的和 物的 结构有 ,不仅此,含有 质或 素的 结构, 有 。

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