1、研究背景HBV慢性感染主要原因HBV特异细胞免疫功能的低下T细胞 树突状细胞(DC)慢性乙型肝炎患者DC成熟、功能异常研究背景(1)特异性CTL数量少低反应HBV慢性感染主要原因HBV特异细胞免疫功能的低下T细胞 树突状细胞(DC)慢性乙型肝炎患者DC成熟、功能异常促进DC成熟、恢复DC的功能增强DC激活特异性抗病毒免疫反应打破免疫耐受彻底清除病毒研究背景(1)特异性CTL数量少低反应获得高频数、功能强HBV特异性的CTL促进DC成熟,增强DC功能CpG CD40L Ad-IL-12转染 Poly(I:C)关于恢复DC功能的研究研究背景(2)研究目的本研究通过在体外进行慢性乙型肝炎患者单核细胞
2、的DC方向转化,并辅以聚肌胞Poly(I:C)刺激,增强DC的成熟和功能。将患者DC经HBV core18-27肽负载后,刺激病人自身的T淋巴细胞。并用Elispot法及本研究室构建的HLA-A2肽四聚体复合物检测病毒特异性T淋巴细胞的数量和功能。研究对象和方法研究对象22例HLA-A2+慢性乙型肝炎患者。HBeAg+患者16例、 HBeAb+患者6例。HBV DNA 均104 copy/ml。排除HCV、HAV、HDV、HEV感染。近半年没有接受过抗病毒治疗。研究方法HLA-A2型别鉴定 DC的体外 增及鉴定 以树突状细胞 抗原 细胞体外 病毒抗原特异性T细胞 Elispot检测 IFN-的T细胞频数 MHC-肽四聚体检测 HBVcore18-27 肽特异性CD8 + T 细胞HLA-A*02型别鉴定 外 淋巴细胞 抗人HLA-A02单抗 细胞 检测 本均 自身 性 。 树突状细胞的体外培养扩增及鉴定 病人PBMC GM-CSF、IL-4 刺激下DC 转化 Poly( I:C)刺激 通过 细胞 检测DC的HLA-DR、CD80、CD86、CD83、CD14 ,进行功能及成熟 的鉴定。