1、一、细菌性灭活疫苗制造细菌性灭活疫苗简称灭活菌苗，种类、苗型甚多，但制造的基本程序差别不大。 （一）菌种与种子 1.菌种制苗用菌种多数为毒力强、免疫原性优良的菌株，通常使用1-3个品系，均由中国兽药监察所传代、鉴定、冻干保存和供应。各种用于制造菌苗的菌种应按规定定期复壮，并进行形态、培养特性、菌型、抗原性和免疫原性鉴定，合格菌种准许用于制苗。 2.种子培养将经鉴定符合标准的菌种接种于菌苗生产规程中所规定的培养基进行增殖培养，经纯粹检查、活菌计数达到标准后即为种子液，用于菌苗生产。种子液通常保存于2-8C冷暗处，不得超过规程规定的使用期限。 （二）菌液培养 大量生产的细菌培养方法甚多，既有手工
2、的， 有 的培养方 。的培养方 通称为 应 培养法， 供 的菌液培养法有 液 培养法、液 通 培养法、 培养法 培养法 。 菌液培养 用 培养法， 方法 得 的细菌液，不 ，currency1培养基的“，所“fi用于制fl 用的抗原。 （三）灭 活 灭活菌苗通常细菌的特性 有的灭活， fi”的灭活进行，种灭活菌苗的灭活方法 -1所。 菌 苗 菌或毒素 灭活方法猪丹毒氢氧化铝菌苗 猪丹毒杆菌 菌液加入甲醛至0.2%-0.5%，37C杀菌18-24h。气肿疽甲醛菌苗 气肿疽梭菌 菌液加甲醛至0.5%，37-38C杀菌72-96h。破伤风类毒素 破伤风梭菌 菌液上清加甲醛至0.4%，37-38C脱毒
3、21-30d。肉毒梭菌C型菌苗（菌体毒素苗）C型肉毒梭菌 菌液加加入甲醛至0.8%，37C杀菌脱毒18d。表 6-1 几种灭活菌苗的灭活方法 （四）浓 缩 为 灭活菌苗的免疫力，培养过程中 菌数的基，通过 方法达到的。常用的 方法 法 法基 法方法 使菌液 。，有细菌生 过程中产生子量 的 性抗原 毒菌产生的 经 将 毒液按 法处 ， 进 制纯 类毒 。 （五）配苗与分装 由于灭活菌苗所用的 不，所苗方法 不。疫 菌苗 灭活的 ，按 制 菌液经 灭活后按 苗。有的 禽霍乱油 菌苗的制程序为 于灭菌的油乳135m110号 油、 11.4m1Span-85、3. ml Tween80混合液中，边搅
4、拌下 量 灭活菌液制。苗和装 应充混匀， 塞塞、贴签 印字。 二、细菌性活疫苗制造弱毒菌种多系冻干品，由中国兽药监察所传代、鉴定、保存与发，数由国 指定单位鉴定、保存与供给。菌种使用前应按规程规定进行复壮、挑 ，并 形态、特性、抗原性和免疫原性鉴定，符合标准后方 用于制苗。将检定合格的菌种接种子于规定的培养基，按规定的增殖培养，经纯粹检查 有关的检查合格者即 为种子液。种子液通常04C 保存2个月，保存期内 为菌苗生产的批量种子使用。 细菌性活疫苗多指弱毒菌苗，尽管种类与苗型甚多，但基本制造程序。（一）菌种与种子按1%3%量将种子液接种于培养基，然后依不菌苗要求进行培养。 毒弱毒菌须 通 培养
5、中 fi”植物油 消泡，通过滤除菌的热空 进行培养制造菌液又布氏菌2号与羊5号弱毒菌经 面培养完后须按规定要求将菌苔洗下制菌液。菌液于04C暗处保存，待抽样经纯粹、活菌数 检查合格后使用。（二）菌液培养为 弱毒菌苗的免疫果， 进行 ， 单位活菌数，常用的依 方法有 法、 法 ， 于 毒菌液内 0.2% 0.25% 基 (CMC)进行 ， 用 。 菌液应抽样 纯粹、活菌数 检查。（三）浓缩经检验合格的菌液，按规定 保护苗，充摇匀后随即进行装，装量必须准确。装好的菌苗迅速送 冻干柜进行预冻、真空干燥，冻于完毕后立即塞、抽空、封口，移 冷库保存，并由质检部门抽样检验。 （四）配苗与冻干流程图1细菌疫
6、苗和类毒素制造工艺流程蛋白质、肉浸液等原料培养基细菌分离菌 种弱毒菌种配置、灭菌鉴定减毒 滤过 脱毒纯化加吸附剂吸附检验配制灭菌检验检验配制灭菌原 料佐 剂灭活菌液配苗、乳化灭活疫苗培 养菌苗原液配 苗活疫苗保护剂类毒素毒 素纯化类毒素菌 液分装、冻干分 装灭活原 料精制类毒素活化种子三、病毒性动物组织疫苗制造 病毒 感 物 内 大量增殖，但各器官组织、部位中增殖病毒的量却有很大的差异，利用病毒增殖迅速、currency1毒量 的组织制造的疫苗称为组织疫苗(tissue vaccine)。物组织疫苗包括 物组织灭活疫苗和 物组织弱毒活苗两类，前者多数由强毒株制造， 瘟结晶紫疫苗、狂犬病羊脑组织疫苗后者均弱毒株生产， 瘟 弱毒乳 组织疫苗、 瘟 弱毒组织疫苗 。物质量 接 到组织疫苗的质量，特别 疫苗的 性和力有 定性的 用， 物必须符合下 标准 (1)应 ( )的 验 物，即 规定的 兽 性病原 物(2)应 所接种病毒 感性 的 物，即品种、 和 方面合 要求的 验 物。 （一）动物选择
