1、 大肠杆菌O157: H7实验诊断研究进展 大肠杆菌O157: H7感染临床表现 出血性肠炎：鲜血样便，腹部痉挛性疼痛，低热或不发热。 溶血性尿毒综合征（HUS）：主要发生在儿童，常出现在腹泻后数天或1-2周。病死率一般在10%，各别可高达50%。 血栓性血小板减少性紫癜（TTP）：主要发生在成年人，尤其老年人。病人主要表现为发热、血小板减少、溶血性贫血、肾功能异常等症状，病情发展迅速，病死率高，有时可出现70%的病人死亡。大肠杆菌O157: H7传染源和传播途经 大肠杆菌O157: H7基本上是一种食源性病原菌，可通过食用大肠杆菌O157: H7污染的牛肉、牛 、牛肉或 、 肉、 、 、 等
2、感染, 可通过人 人、人 传播。在实验 ，大肠杆菌O157: H7可 感染小 、 、 、牛等 。 大肠杆菌O157: H7的感染 成为 性的 情 不 一、菌 1currency1 “病原有fi要fl 。 的是性血性腹泻 ，其是HUS、TTP等病人，”其是高 。 基： 、大 的 、的SD-39（MSD） 和 的 （ - ） 和 （0 5% 的 （ -） 大肠杆菌O157: H7 基 基 H7 血 发基 菌 ： 10mg/L 生 的EB肉或肠 菌 10mg/L 生 或10mg/L - 的大肉 生 MEC肉 月桂基 肉 入下例任何一种抑 剂均可 基的选择性 0.05mg/L 2.5mg/L 生 10
3、mg/L 万古 40mg/L2免疫磁珠currency1法 免疫磁珠currency1法是将特异性 体吸附于一种能被吸附的磁性珠子上,然后利用 原 体反应特性将样 中的大肠杆菌O157: H7富集起来。 方法:1. 菌;2.取样 1ml大肠杆菌O157: H7免疫磁珠20ul;3.轻轻混合10currency1钟;4.将试管插入磁架上;5.吸取上 ;6.PBS,fi复3-5过程;7.取管壁沉淀 ,划线 种于CT- ( - , - )等选择性基。376-24小时，挑取可疑菌落进行。 Chapman等 共检测大便标本690份, 免疫磁珠currency1法检出25 。用免疫磁珠currency1法
4、currency1的l2株大肠杆菌O157: H7中,直 阳性仅5株。 Wright等将 种大肠杆菌O157: H7的碎牛肉标本置有万古 和的缓冲 ,然后直 或用大肠杆菌O157 体包被的磁珠currency1菌后, 种于CT-SMAC,结 直 检出量为200cfu/g,而免疫磁珠currency1法仅需 2cfu/g 。 Chapman等用EC肉 菌,然后用免疫磁珠currency1法富集牛粪便大肠杆菌O157: H7菌株,”用选择性基currency1，并 CR-SMAC和CT-MAC直 作比较。用前检测 种12株不同大肠杆菌O157: H7菌株的牛粪便悬 ,其敏感性比在两种基上直 高10
5、0倍。 Cubbon等用免疫磁currency1法（IMS）检测牛粪便和食 标本的大肠杆菌O157: H7。在一起经牛 传播的大肠杆菌O157: H7爆发中,用IMS、粪便和多聚酶链反应(PCR)检测Vero毒 基因的携带,用三种方法粪便大肠杆菌O157: H7的currency1率作比较结 ,在受检的142份粪便标本中,直 和IMS均阳性20 份,另13份仅IMS阳性。因此,IMS提高大肠杆菌O157: H7感染病例的检出率, PCR符合率高。 目前，污染的肉、家畜，甚至 用 均面临大肠杆菌O157: H7的卫生威胁。检测食 和 源中肠病原体使用传统的法,结 不理想。IMS和其它检测的研究表
6、明,快速检测食 和环境标本似乎前景好,Yu检等 IMS结合发 检测法(ECL)检测食 和污染 中的大肠杆菌。结 ,在原缓冲 检出大肠肠菌的 为100 1000 cfu/lm,在食 检出的 为1000 2000cfu/lm ，检测时 currency1快,一般不 1小时。菌O157: H7菌株的牛粪便悬 ,其敏感性比在两种基上直 高100倍。在测牛 的4 月 , 牛 集1024份直肠标本,其中检出大肠杆菌O157: H784份（8.2%）84份中有23份（27.4%） 直 和IMScurrency1。23份中15份 两种基、5份仅 CT-SMAC、3份仅 CR SMACcurrency1,其 6
7、1份(72.6%)仅IMScurrency1。用 20 的PBS 磁珠可减少其它 生 磁珠的 特异性结合。用 的 体包被磁, 大肠杆菌O157: H7不结合。IMS有快速、 作 、特异性高,在 行病 中有。 3生 反应 目前多 家使用的O157和 H7特异性 体 少数菌 有不同程currency1反应。因此用生 试验为大肠杆菌是“的。 大肠杆菌的主要生 反应结 下： fi试验（+） fl （+） （+） （+） （ /+） （ ） 尿 （ ） 基（+） 基（+） V-P试验（ ）” （ ） 酶（ ） 酶（+/ ） 酶（ +/ ） 酶（ ） （ ） O157有别fl 的生 反应表1。 MUG4- 基 -fl 。大多数大肠杆菌 有fl 酶,可 MUG生 , O157: H7中大多数菌株 不 MUG。Thompson等一种快速MUG试验,取 MUG试剂0.5ml置试管中, 菌 挑取 检菌 混 于其中,44.5置20min,高 源下 结 ,生 为阳性。 血 检测1 集试验2 体 免疫 3 4免疫 5 集 6. 血 currency1 ( 7 原 体检测统8. 免疫 法
