现代生物学实验技术实验报告.doc

现代生物学实验技术实验报告实验一、超薄切片一、实验目的学习掌握常规生物样品前处理技术及样品包埋块的制备技术。二、实验材料植物幼嫩叶片、小鼠肝脏细胞三、实验试剂2.5戊二醛、PBS、1锇酸、30丙酮、100丙酮、Epon812包埋液、蜡油四、实验器材离心管、玻璃棒、滴管、移液枪、刀片、镊子、牙签、烘箱、切片机、五、实验步骤1、取材固定：从植株上取叶片或者取小鼠肝脏细胞，切取1mm3左右大小的组织块，立即放入PBS（pH7.2)配制的2.5%戊二醛中固定1小时。2、用0.1molPBS缓冲液冲洗三次每次35分钟。3、1锇酸固定1小时，然后用缓冲液冲洗三次每次35分钟。4、丙酮脱水：3050708090100100 每级510分钟5、浸透：脱水剂：包埋剂=3：1 1小时 脱水剂：包埋剂=1：3 过 夜6、聚合：45 12h 60 24h磷酸缓冲液 0.2molL-1 PBS 配制A液：Na2HPO4