1、分析方法验证盐酸氟西汀验证实例,现代验证系列,简介,美国某公司生产10mg和20mg盐酸氟西汀两种相胶囊其重量与配方相同,仅盐酸氟西汀与辅料比例不同所验证方法是公司内部对美国和欧盟市场产品产品放行和稳定性研究中使用的含量和杂质分析的方法该分析方法已经建立,2,含量与杂质的分析方法基本一致,验证项目清单,精密度线性范围准确性,低浓度盐酸氟西汀验证m-盐酸氟西汀验证选择性耐用性,3,精密度,项目:系统重复性方法重复性中间精密度,4,系统重复性,方法按照分析方法要求,配制盐酸氟西汀标准溶液重复进样5次计算峰面积平均值相对标准偏差,5,目的是检查系统是否可靠,方法重复性,方法按照分析方法要求,分别配制
2、20mg盐酸氟西汀样品溶液6个分别进样计算含量相对标准偏差,6,目的是检查分析方法本身是否可靠,中间精密度,方法由另外一个分析员在不同日期另外的仪器上按照分析方法要求分别配制20mg盐酸氟西汀样品溶液6个计算含量及相对标准偏差,7,目的是检查分析方法对不同人,日期,仪器是否可靠,线性,方法正常含量分析用标准溶液浓度的50%到200%范围内均匀选择5个点配制相应浓度的盐酸氟西汀含量标准溶液分别进样计算线性回归分析相关系数斜率Y轴截距,8,范围,方法正常20mg样品含量分析浓度50%到200%范围内均匀选5个点并配制盐酸氟西汀样品溶液分别进样计算线性回归分析相关系数斜率Y轴截距,9,准确性,项目:
3、标准品准确性样品准确性,10,标准品准确性,方法按照分析方法要求配制盐酸氟西汀标准溶液重复进样5次计算准确性测定浓度值用峰面积按照回归方程进行计算,11,样品准确性,方法按照产品的标示量在70%到180%正常标示量选均匀选择4个点混合辅料与及盐酸氟西汀每点3个样品分别进样计算回收率测定浓度值用峰面积按照回归方程进行计算,12,低浓度盐酸氟西汀验证,项目:线性准确性系统重复性定量限度检测限度,13,线性,方法按照分析方法要求均匀选择6个点配制标示量的0.02%到1.0%含量标准溶液分别进样计算线性回归分析相关系数斜率Y轴截距,14,准确性,方法配制杂质浓度的标准溶液进样6次计算按峰面积用回归线性
4、方程来计算测量浓度平均值相对标准偏差,15,系统重复性,方法配制工作浓度的0.02%和0.05%标准溶液分别进样6次计算峰面积的平均值相对标准偏差,16,定量限度,用系统重复性实验中的标准偏和线性回归方程中的斜率差计算,17,检测限度,用系统重复性实验中的标准偏和线性回归方程中的斜率差计算,18,m-盐酸氟西汀验证,项目:线性检测限度定量限度准确性精密度方法重复性中间精密度,19,m-盐酸氟西汀简介,m-盐酸氟西汀是产品中的一个杂质m-盐酸氟西汀在0.05%1.0%区间呈线性相对响应因子(对盐酸氟西汀):F=132.73952/74859534=1.8,20,定量限度,根据盐酸氟西汀定量限度相
5、对响应值计算盐酸m-氟西汀定量限度,21,检测限度,根据盐酸氟西汀检测限度相对响应值计算盐酸m-氟西汀检测限度,22,回收,方法:分别6个标空白中加0.05%的m-盐酸氟西汀进样计算:回收率实际检测值用峰面积按照回归线性方程计算,23,准确性,方法:在已知m-盐酸氟西汀含量的样品中分别在0.4%,0.5%和0.6%3个水平加入m-盐酸氟西汀标准品每组3个样品中计算:回收率实际检测值用峰面积按照回归线性方程计算,24,重复性,项目:方法重复性中间精密度,25,方法重复性,方法:按照要求配制溶液反复进样6次计算:平均值标准偏差相对标准偏差,26,中间精密度,方法:另外一个分析员在不同日期另外的仪器
6、上按照方法重复性方法配制溶液6次并分别进样计算:含量相对标准偏差,27,选择性,降解原样酸降解碱降解氧化降解日光降解溶液加热降解粉末加热降解,系统适应性空白,28,简介,降解产物的选择性试验是分析方法稳定性指示性验证的一个重要部分主要目的是通过试验证明各种降解的产物与所要分析的物质可以完全分开本试验中的主要设备是二极管矩阵检测器并通过计算纯度角,匹配角,纯度阈值,匹配阈值,含量来证明峰的纯度,29,原样品,方法20mg胶囊按照规定的方法进样分析标准品按照规定的方法进样分析,30,酸降解,样品称量大约等量20mg的样品转移到50ml容量瓶中加入20ml稀释剂并超声处理10分钟加1ml的浓盐酸放置
7、18小时用10N氢氧化钠中和到pH5.5稀释到刻度过滤,31,酸降解,标准品称量大约22mg的标准品转移到50ml容量瓶中加入20ml稀释剂,加2ml的盐酸放置18小时用10N氢氧化钠中和到pH5.5稀释到刻度,32,碱降解,样品称量大约等量20mg的样品转移到50ml容量瓶中加入20ml稀释剂,并超声处理10分钟加1ml的5N氢氧化钠放置18小时用5N盐酸中和到pH5.5稀释到刻度过滤,33,碱降解,标准品称量大约22mg的标准品转移到50ml容量瓶中加入20ml稀释剂加2ml的5N氢氧化钠放置18小时用5N盐酸中和到pH5.5稀释到刻度,34,氧化降解,样品称量大约等量20mg的样品转移到
8、50ml容量瓶中加入20ml稀释剂并超声处理10分钟加1ml的30%过氧化氢放置5小时稀释到刻度过滤,35,氧化降解,标准品称量大约22mg的标准品转移到50ml容量瓶中加入20ml稀释剂2ml的30%过氧化氢放置5小时稀释到刻度,36,阳光降解,样品称量大约等量20mg的样品在500w/hr.cell下曝光1小时设定BST35C,ACT45C,37,阳光降解,标准品称量大约等量20mg的样品在500w/hr.cell下曝光1.5小时设定BST35C,ACT42C,38,溶液加热降解,样品称量大约等量20mg的样品转移到50ml容量瓶中加入20ml稀释剂并超声处理10分钟稀释到刻度取4ml溶液
9、并转移到坩埚内与105C加热2小时冷却到室温过滤,39,溶液加热降解,标准品4ml的工作标准液转移到坩埚内与105C加热2小时冷却到室温过滤,40,粉末加热降解,样品称量大约等量20mg的样品转移到合适的试管中于100C加热4小时冷却到室温转移到50ml容量瓶加入20ml稀释剂并超声处理10分钟稀释到刻度过滤,41,粉末加热降解,标准品称量大约等量45mg的标准品转移到合适的试管中于100C加热4小时冷却到室温转移到100ml容量瓶稀释到刻度过滤,系统适应性,系统适应性按照规定方法进行氟西汀与m-氟西汀间分离度应不小于2.0氟西汀峰拖尾因子应不大于2.0氟西汀的典型保留时间大约在9.5到10.0分之间,43,空白,分析两个批号的空白与氟西汀,并分析混合样品没发现干扰峰,44,标准与样品溶液的稳定性,项目:标准溶液样品溶液,45,标准溶液稳定性,方法配制标准溶液冷藏于4C8C放置30天以上与两个新配制的标准溶液一道测试,46,样品溶液稳定性,方法配制样品溶液冷藏放置48小时重新分析,47,耐用性,项目:提取效率析因设计,48,提取效率,方法取三个样品按照要求配置溶液但超声分为5,10和15分钟每个样品测定3次,49,析因设计因素,50,析因设计参数,流动相构成流量参数柱温柱生产商,51,柱生产商,52,析因设计,53,分析方法验证盐酸氟西汀验证实例,现代验证系列,
