1、黑龙江迪龙制药有限公司,配液系统的清洁验证,1、引言,1、引言,1.1 概述 PYG300-550型配液系统是冻干粉针剂车间2生产线的配液设备，位于C级洁净区内的浓配和稀配间内。该系统主要由进浓配罐、稀配罐、卫生离心泵、砂棒过滤器、微孔膜过滤器、分装罐、管道和控制器组成，物料与浓配罐、稀配罐、卫生离心泵、砂棒过滤器、微孔膜过滤器、分装罐、管道内表面直接接触。,1、引言,1.2 验证目的 通过试验结果证明所制定的PYG300-550型配液系统的清洁规程能够清除浓配罐、稀配罐、卫生离心泵、砂棒过滤器、微孔膜过滤器、管道内表面上的活性药物残留，使设备的清洗效果达到洁净要求，避免产品被残留物料和微生物
2、污染。,1、引言,1.3 验证人员及其职责：,1、引言,1.4 验证周期： 每年进行一次再验证。 出现下列情况之一时，必须进行清洁规程的再验证： 增加新产品； 设备、生产工艺或清洁规程发生变更； 清洁/污染设备保留时间发生改变； 清洁剂发生变更； 处方发生变更。1.5 验证进度安排：2013年XX月XX日2013年XX月XX日,2、清洁验证前的准备工作,2.1 验证所需文件,2、清洁验证前的准备工作,2.2 人员培训文件的检查 参与PYG300-550型配液系统清洁验证的人员均接受了验证前的培训； 验证人员已熟练掌握了验证原理和操作方法。,3、执行的清洁灭菌规程,3.1 清洁规程及其编号 PY
3、G300-550型配液系统清洁标准操作规程（草案） 文件编号SOP-FZ-2310-003.2 清洁汇总 清洁剂：注射用水、 0.5%氢氧化钠溶液。 清洁工具：丝光毛巾。 清洁方式： 手工清洁； 在线清洁（CIP）； 离线清洁（COP）。,3、执行的清洁灭菌规程,3.3 清洁步骤 更换状态标识 摘下PYG300-550型配液系统状态标识卡框中的绿色“正在生产中”卡，填写并插入黄色“待清洁”状态标识 拆卸 打开浓配罐、稀配罐的排污阀，排空配液罐； 拧开快装卡箍、拆下砂棒过滤器、筒式过滤器和平板式过滤器（另行清洁）； 用专用短管替代上述滤器，拧紧快装卡箍。,3、执行的清洁灭菌规程, 预洗 完全开启
4、浓配罐顶部的注射用水阀门，用热水（7080）喷淋冲洗罐体内表面3分钟以上； 关闭排污阀，继续冲洗浓配罐体内表面2分钟以上； 启动浓配罐磁力搅拌器、搅拌清洗3分钟以上。在搅拌清洗过程中，不断开启取样阀，至少10次； 启动1卫生泵，将浓配罐内的热水送至稀配罐内； 启动2卫生泵，用稀配罐内的热水循环冲洗稀配罐与分装罐之间的循环管道3分钟以上；,3、执行的清洁灭菌规程, 预洗（续） 打开稀配罐的排污阀，排尽稀配罐内的清洗水； 关闭排污阀，完全开启稀配罐顶部的注射用水阀门，用热水（7080）喷淋冲洗罐体内表面3分钟以上； 启动稀配罐磁力搅拌器（45转/分），用稀配罐内的热水循环冲洗稀配罐与分装罐之间的循
5、环管道3分钟以上；在搅拌清洗过程中，不断开启取样阀，至少10次； 打开稀配罐的排污阀，排尽稀配罐内的清洗水。,3、执行的清洁灭菌规程, 清洗 开启浓配罐顶部的注射用水阀门，送热水（70 80）约250Kg至浓配罐内； 启动浓配罐磁力搅拌器（45转/分），加入1.5kg氢氧化钠，搅拌5分钟以上，补加注射用水至300kg； 搅拌清洗浓配罐15分钟后，启动1卫生泵，将浓配罐内的0.5%氢氧化钠溶液送至稀配罐内； 启动2卫生泵，用稀配罐内的碱液循环冲洗稀配罐与分装罐之间的循环管道15分钟以上。 打开稀配罐的排污阀，排尽稀配罐内的碱液。,3、执行的清洁灭菌规程, 冲洗 完全开启浓配罐顶部的注射用水阀门，
6、连续喷淋冲洗罐体内表面，直至排出液的pH值与冲洗水的pH值一致（0.2）； 关闭排污阀，继续冲洗浓配罐体内表面2分钟以上； 启动1卫生泵，将水送至稀配罐内； 启动2卫生泵，用稀配罐内的水循环冲洗稀配罐与分装罐之间的循环管道3分钟以上； 打开稀配罐的排污阀，排尽稀配罐内的清洗水。,3、执行的清洁灭菌规程, 冲洗（续） 关闭稀配罐排污阀门，启动磁力搅拌器，完全开启稀配罐顶部的注射用水阀门，连续喷淋冲洗3分钟以上、循环冲洗3分钟以上； 重复上述冲洗、循环，直至排出液的pH值与冲洗水水的pH值一致（0.2）； 打开稀配罐排污阀门，排尽稀配罐内的清洗水。,3、执行的清洁灭菌规程, 最终冲洗 关闭浓配罐、
7、稀配罐阀门，完全开启浓配罐顶部的的注射用水阀门，喷淋冲洗罐体内表面1分钟。 启动浓配罐磁力搅拌器，搅拌1分钟以上； 将浓配罐内的最终冲洗水送至浓配罐内，启动2卫生泵，循环冲洗稀配罐与分装罐之间的循环管道3分钟以上； 打开浓配罐、稀配罐的排污阀，排尽罐内存水。,3、执行的清洁灭菌规程, 灭菌 关闭浓配罐、稀配罐排污阀，打开纯蒸汽疏水阀； 打开浓配罐体顶部的纯蒸汽阀门，向罐体通入纯蒸汽。待纯蒸汽疏水阀喷出汽水混合物时，分别打开浓配罐、稀配罐排污阀，排水（冷凝水）1分钟以上； 关闭浓配罐、稀配罐排污阀，待管道终端温度达到121后，计时灭菌30分钟。,4、最难清洁部位的确定,由于药液在PYG300-5
8、50型配液系统中的浓配罐、稀配罐、分装罐内停留时间最长，加之喷淋球距罐底距离最远，清洗剂的流速相对较低，我们据此确定浓配罐、稀配罐内表面底部为最难清洁部位。,5、清洗验证标记产品的选择, 从活性成分的毒性来讲，注射用穿琥宁和注射用炎琥宁的毒性最大。 从溶解性方面来讲，注射用穿琥宁属于溶解。基于上述理由，注射用穿琥宁被确定为清洗验证的标记产品。,6、可接受的残留限度,6.1 目检可接受限度： 最终冲洗水与空白溶剂无颜色差异； 可见异物符合规定。,6、可接受的残留限度,6.2 化学残留可接受限度 最低日治疗剂量的1/1000 计算公式： L1/1000=(MTDa/1000)(Nb/MDDb)FV
9、 式中：MTDa为清洗前产品最小每日给药剂量中的活性成分含量； Nb清洗后产品的批量（285Kg）； MDDb为清洗后产品的最大日给药剂量的活性成分含量； F为安全因子（F=50%）； V为最终淋洗循环水体积(100000ml)。,6、可接受的残留限度,6.2 化学残留可接受限度（续1） 化学残留可接受限度列表,6、可接受的残留限度,6.2 化学残留可接受限度（续2） 浓度限度10ppm（10mg/kg） 计算公式： L=10BF/V 式中：L为化学残留物可接受限度（mg/ml）； 10为化学残留可接受限度（10ppm）； B为下批产品的最小生产批量（285Kg）； F为安全因子（F=50%）
10、； V为最终淋洗循环水体积(100000ml)。,6、可接受的残留限度,6.2 化学残留可接受限度（续3） 化学残留可接受限度列表, 从最低日治疗剂量的1/1000和浓度限度10ppm计算可知，穿琥宁在最终冲洗循环水中的残留限度不得超过1.43mg/ml。,6、可接受的残留限度,6.3 最终冲洗水微生物可接受限度： 最终冲洗水微生物8CFU/100ml,7、取样,7.1 取样点的确认 对于配液系统而言，设备不便拆卸，也就不可能对“最难清洁部位”进行直接擦拭取样。 选择清洗线路相对最下游的排污口（浓配罐、稀配罐）作为取样点，也能够体现系统的整体清洁效果。,7、取样,7.2 取样方法(淋洗法) 化
11、学残留取样 反复开关取样阀5次以上（含5次），冲洗取样阀； 用试剂瓶接取水样，冲洗瓶内壁两次，装样200250ml，加塞密封； 在瓶签上注明取样日期、取样位置、样品名称及取样目的。,7、取样, 微生物限度取样 执行先取化学残留样，后取微生物限度样的原则；用75%酒精棉球擦拭取样阀外表面、灭菌试剂瓶口外表面各二遍； 用灭菌试剂瓶接取水样，冲洗瓶内壁两次，装样200250ml，密封； 在瓶签上注明取样日期、取样位置、样品名称及取样目的。 在样品传递和储存期间，应避免样品受热（25）或过冷（8），并在取样的当日处理完毕。,7、取样,7.3 取样方法(淋洗法)的验证 淋洗法限度检查不需做回收率验证，只
12、需对最终冲洗水直接检测或稀释后检测即可。 如：注射用穿琥宁在最终冲洗水中的残留限度为1.43mg/ml，则冲洗水样的峰面积低于该限度值对应的峰面积即可。 淋洗法定量检查需作回收率验证，可以将已知量的活性成分（在限度附近）溶液均匀涂抹在配液罐内表面，用淋洗溶剂冲洗，回收率应不低于95%。,8. 检验方法验证,8.1 专属性试验 试验方法：精密称取葡萄糖约7.5mg（与10mg穿琥宁相对应），置100ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。按穿琥宁含量测定方法，精密量取10l，注入液相色谱仪，记录色谱图。 接受标准：辅料（葡萄糖）不干扰穿琥宁的限度检测。,8. 检验方法验证,8.2 检测限试验
13、 试验方法：精密称取约穿琥宁10mg，置100ml容量瓶中，加流动相溶解稀释至刻度，摇匀，作为母液。分别取母液稀释成10g/ml、5g/ml、1g/ml、0.2g/ml、0.04g/ml的溶液，精密量取10l，注入液相色谱仪，记录色谱图。 接受标准：以信噪比为3：1计算检测限。,8. 检验方法验证,8.3 化学残留限度测定 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂剂；以0.05%磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节PH值至2.50.05）-甲醇（3：7）为流动相；检测波长为251nm。理论板数按脱水穿心莲内酯琥珀酸半脂峰计算不低于3000。 测定法：精密量取最终冲洗水7.5ml（约相当于
14、残留穿琥宁10mg），置100ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取10l，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯对照品，同法测定。 接受标准：最终冲洗水中残留穿琥宁的峰面积不得超过对照品的峰面积。,8. 检验方法验证,8.4 样品溶液稳定性试验 试验方法：将最终冲洗水样室温放置24小时，每隔2小时测定一次含量，共6次。 接受标准：测定结果不低于初始值的90%。,9、喷淋球覆盖验证, 操作方法： 取维生素B2(核黄素)50mg，加水5000ml使溶解。 用洁净布蘸取维生素B2溶液，均匀涂抹在浓配罐和稀配罐内表面，尤其是罐顶封头部位。 放置4小时，用荧光灯照射罐体
15、内表面，可见明显黄绿色荧光。 完全开启浓配罐、稀配罐顶部的注射用水阀门，用热水（7080）喷淋冲洗罐体内表面3分钟。 接受标准：在荧光灯照射下，罐体内表面无荧光显现。,10、清洁验证实施, 操作方法： 按注射用穿琥宁生产工艺规程（STP-FZ-1007-00）规定的处方量（0.2g每9.2万支处方）连续进行3个批次的配液操作，每天1批。 灌装结束后，放置4小时，再按PYG300-550型配液系统清洁标准操作规程（草案）清洁配液系统。 按本方案规定的取样位置、取样方法、取样量，由经培训合格的取样人取样。接受标准：记录准确、完整。,11、清洁有效期的确认, 操作方法：清洁保留24小时后，最终冲洗方法再次冲洗配液系统，取样，检查微生物限度； 接受标准：8CFU/100ml。,12、偏差的处理, 根据验证结果超标情况，对清洁验证过程，包括清洁规程、取样方法、清洁实施情况等方面进行调查； 风险分析； 制定新方案； 重新验证。,
