1、实验 动物接收标准操作规程 题目：实验动物接收标准操作规程 第 1 页，共 1 页 制定人： 李秀，黎宁，杨寿清 制定日期： 2013.04.25 审核人： 实验动物管理与动物福利伦理委员 会 审核日期： 2013.05.29 批准人： 实验动物管理与动物福利伦理委员 会 批准日期： 2013.05.31 生效日期 ： 2013.09.01 颁发日期： 2013.06.05 修订人： 修订日期： 编写 /修订记录 版本 摘要 生效日期 编写 /修订 批准 1 目的 确保接收实验动物的健康和质量，制定本程序。 2 适用范围 适用于实验动物接收的操作活动。 3 职责 3.1 实验动物中心管理人员负
2、责监督、管理； 3.2 严格遵守相应级别实验动物检疫操作流程。 4. 流程 4.1 购入动物时，应向有实验动物生产许可证、信誉好、动物质量佳、有严格管理和一定规模的单位购入； 4.2 当动物抵达后，首先检查带空气过滤装置的运输 箱 密封情况，对照运输箱上的标签，核对动物的信息与要求是否相符； 4.3 运输箱表面用消毒液喷雾消毒，放入传递窗，关门，打开紫外灯照射 30 分钟； 4.4 打开动物运输箱，转移至动物笼具内，放入检疫室检疫，观察是否有任何 异常行为或疾病的迹象； 4.5 在检疫室饲养 5-7 天以后，检疫合格 方 可转入饲养室。 短期 常规 实验动物检疫标准操作规程 题目：短期 常规
3、实验动物检疫标准操作规程 第 1 页，共 1 页 制定人：李秀，黎宁，杨寿清 制定日期： 2013.04.25 审核人： 实验动物管理与动物福利伦理委员 会 审核日期： 2013.05.29 批准人： 实验动物管理与动物福利伦理委员 会 批准日期： 2013.05.31 生效日期： 2013.09.01颁发日期： 2013.06.05 修订人： 修订日期： 编写 /修订记录 版本 摘要 生效日期 编写 /修订 批准 1 目的 确保短期动物实验进度顺利完成，给予微生物要求低的实验动物简易检疫程序，制定本程序。 2 适用范围 实验周期 为 2 个月以内，实验动物微生物系对实验结果影响较小的实验项目
4、 。 3 职责 3.1 实验动物中心管理人员负责监督、管理； 3.2 严格遵守相应级别实验动物检疫操作流程。 4. 流程 4.1 新进动物必须隔离饲养于检疫室 5-7 天，确认无异常后，移入饲养间。 4.2 动物观察内容： 4.2.1 皮毛： 有无光泽、竖毛、出血、污物、脱毛等 4.2.2眼 ： 有无眼屎、流泪、角膜损伤等 4.2.3 口腔 ： 有无流涎、出血等 4.2.4 耳 ： 有无外伤、耳壳曲折等 4.2.5 四肢 ： 有无外伤、弯曲脱臼、肿胀等 4.2.6 肛门 ： 有无腹泻、血便、脱肛等 4.2.7 精神和食欲 ： 有无沉默、倦怠、不活跃、食欲不振、拒食等 4.2.8 营养状况 ：
5、有无消瘦、过度肥胖、成长异常等 4.2.9 姿势和步态 ： 有无姿势异常、行走和站立困难、运动失调、跛行等 4.2.10 触觉 ： 弹性、硬度、肿胀、疼痛等 5.检疫结果 隔离观察一周，如观察内容无异常则转入动物中心饲养间，如有异常 由动物检疫员进一步 检疫相关微生物指标，查明原因。 如果为国标要求阴性项目感染 则整批淘汰 ，其他情况根据设施内实际微生物情况 提出 合理化建议，最终处理决定由实验 团队 、 动物中心 工作人员和分管领导讨论决定。 长期常规实验动物检疫标准操作规程 题目： 长 期 常规 实验动物检疫标准操作规程 第 1 页，共 2 页 制定人：李秀，黎宁，杨寿清 制定日期： 20
6、13.04.25 审核人： 实验动物管理与动物福利伦理委员 会 审核日期： 2013.05.29 批准人： 实验动物管理与动物福利伦理委员 会 批准日期： 2013.05.31 生效日期： 2013.09.01颁发日期： 2013.06.05 修订人： 修订日期： 编写 /修订记录 版本 摘要 生效日期 编写 /修订 批准 1 目的 有效监控长期饲养 的 实验动物体内 微生物系 的状况， 预防传染性疾病发生 ，减少对实验人员和中心设施的潜在威胁 ，制定本程序 。 2 适用范围 实验周期 大于 2 个月 ，实验动物微生物系对实验结果影响较小的实验项目。 3 职责 3.1 实验动物中心管理人员负责
7、监督、管理； 3.2 严格遵守相应级别实验动物检疫操作流程。 4. 流程 4.1 新引进的动物必须隔离饲养于检疫室 5-7 天，确 认无异常后，移入饲养间。 4.2 动物观察内容： 4.2.1 皮毛： 有无光泽、竖毛、出血、污物、脱毛等 4.2.2 眼 ： 有无眼屎、流泪、角膜损伤等 4.2.3 口腔 ： 有无流涎、出血等 4.2.4 耳 ： 有无外伤、耳壳曲折等 4.2.5 四肢 ： 有无外伤、弯曲脱臼、肿胀等 4.2.6 肛门 ： 有无腹泻、血便、脱肛等 4.2.7 精神和食欲 ： 有无沉默、倦怠、不活跃、食欲不振、拒食等 4.2.8 营养状况 ： 有无消瘦、过度肥胖、成长异常等 4.2.
8、9 姿势和步态 ： 有无姿势异常、行走和站立困难、运动失调、跛行等 4.2.10 触觉 ： 弹性、硬度 、肿胀、疼痛等 4.3 实验过程中哨兵鼠监测： 4.3.1 哨兵鼠种类： ICR 小鼠， SD 大鼠。 4.3.2 哨兵鼠饲养：每排笼架对角线位置 放 （左上 +右下或者左下 +右上） 2 笼哨兵鼠， 每笼 2只。 哨兵鼠所用垫料为同排笼盒换下来的脏垫料混合少许新鲜垫料，饲 料 与饮水与实验鼠相同。 4.3.3 样 品采集方法 ： a.麻醉 腹腔注射 1.25%的三溴乙醇（ 0.25ml-0.3ml/20-30g）。 b采血 1mm 无菌毛细血管从鼠眼眶静脉丛采血约 0.2ml放入无菌指形管
9、中。具体方法：采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的 颈部 (大鼠采血需带上纱手套 )，应防止动物窒息。当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧，使眶后静脉丛充血。右手持 1mm 无菌毛细血管与鼠面成 45 的夹角，由眼内角刺入，针头斜面先向眼球，刺入后再转 180 度使斜面对着眼眶后界。刺入深度，小鼠约 2 3mm，大鼠 4 5mm。当感到有阻力时即停止推进，同时，将针退出约 0.1-0.5mm，边退边抽。若穿刺适当血液能自然流入毛细管中，当得到所需的血量后，即除去加于颈部的压力，同时，将采血器拔出。 c分离血清 血液室温（ 20-25 ）静置 20 分钟后， 3000r/mi
10、n 离心 15min，在超净台内吸取血清。 4.3.4 检测项目：清洁级小鼠（ 鼠痘病毒，小鼠肝炎病毒，仙台病毒 ）； SPF 级小鼠（ 鼠痘病毒，小鼠肝炎病毒，仙台病毒，小鼠肺炎病毒，呼长孤病毒 III 型，小鼠细小病毒 ）；清洁级大鼠（ 汉坦病毒，仙台病毒 ）； SPF 级大鼠（ 汉坦病毒，仙台病毒，小鼠肺炎病毒，呼长孤病毒 III 型，大鼠细小病毒 RV 株，大鼠细小病毒 H-1 株，大鼠冠状病毒 ）。 4.3.5 检疫 频率： 两 个月一次。 4.4 结果分析 ： 检验合格的动物继续饲养，不合格动物整批淘汰。 高标准实验动物检疫标准操作规程 题目：高标准实验动物检疫标准操作规程 第 1
11、 页，共 2 页 制定人：李秀，黎宁，杨寿清 制定日期： 2013.04.25 审核人： 实验动物管理与动物福利伦理委员 会 审核日期： 2013.05.29 批准人： 实验动物管理与动物福利伦理委员 会 批准日期： 2013.05.31 生效日期： 2013.09.01颁发日期： 2013.06.05 修订人： 修订日期： 编写 /修订记录 版本 摘要 生效日期 编写 /修订 批准 1 目的 保证特别实验对 实验动物 体 内病毒、病原菌和寄生虫的 要求 ， 预防传染性疾病发生 ，减少对实验人员和中心设施的潜在威胁 ，制定本程序 。 2 适用范围 实验动物微生物系对实验结果影响较 大 的实验项
12、目 ，如制备生物制剂 。 3 职责 3.1 实验动物中心管理人员负责监督、管理； 3.2 严格遵守相应级别实验动物检疫操作流程。 4. 流程 4.1 新引进的动物必须隔离饲养于检疫室 5-7 天，确认无异常后，移入饲养间。 4.2 动物观察内容： 4.2.1 皮毛： 有无光泽、竖毛、出血、污物、脱毛等 4.2.2 眼 ： 有无眼屎、流泪、角膜损伤等 4.2.3 口腔 ： 有无流涎、出血等 4.2.4 耳 ： 有无外伤、耳壳曲折等 4.2.5 四肢 ： 有无外伤、弯曲脱臼、肿胀等 4.2.6 肛门 ： 有无腹泻、血便、脱肛等 4.2.7 精神和食欲 ： 有无沉默、倦怠、不活跃、食欲不振、拒食等
13、4.2.8 营养状况 ： 有无消瘦、过度肥胖、成长异常等 4.2.9 姿势和步态 ： 有无姿势异常、行走和站立困难、运动失调、跛行等 4.2.10 触觉 ： 弹性、硬度、肿胀、疼痛等 4.3 新动物血清病毒检疫： 4.3.1 采血实验动物的选择： a.新进实验动物满 5 周龄（断奶后 2 周）随机抽取 3%（最少 3只）采血，购买需做好预算。 b.不满 5 周龄的老鼠不可直接检疫，需生产单位提供对方动物房内的哨兵鼠或者其他能代表该批小鼠健康情况的鼠，对此检疫。或者该批小鼠隔离饲养，到 5 周龄进行检疫。 c.供检疫的鼠采需 0.2ml，采血后老鼠死亡或者不适合进行科研实验，对于特别珍贵的老鼠可
14、以与本设施内原有小鼠一起养 3 周后检测设施内的鼠。 4.3.2 样品采集方法： a.麻醉 腹腔注射 1.25%的三溴乙醇（ 0.25ml-0.3ml/20-30g）。 b.采血 1mm 无菌毛细血管从鼠眼眶静脉丛采血约 0.2ml放入无菌指形管中。具体方法：采血者的左手拇食两指 从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈部 (大鼠采血需带上纱手套 )，应防止动物窒息。当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧，使眶后静脉丛充血。右手持1mm 无菌毛细血管与鼠面成 45 的夹角，由眼内角刺入，针头斜面先向眼球，刺入后再转180 度使斜面对着眼眶后界。刺入深度，小鼠约 2 3mm，大鼠 4 5mm。当感到
15、有阻力时即停止推进，同时，将针退出约 0.1-0.5mm，边退边抽。若穿刺适当血液能自然流入毛细管中，当得到所需的血量后，即除去加于颈部的压力，同时，将采血器拔出。 c.分离血清 血液室温（ 20-25 ）静置 20 分钟后， 3000r/min 离心 15min，在超净台内吸取血清。 4.3.3 检测项目：清洁级小鼠（ 鼠痘病毒，小鼠肝炎病毒，仙台病毒 ）； SPF 级小鼠（ 鼠痘病毒，小鼠肝炎病毒，仙台病毒，小鼠肺炎病毒，呼长孤病毒 III 型，小鼠细小病毒 ）；清洁级大鼠（ 汉坦病毒，仙台病毒 ）； SPF 级大鼠（ 汉坦病毒，仙台病毒，小鼠肺炎病毒，呼长孤病毒 III 型，大鼠细小病毒
16、 RV 株，大鼠细小病毒 H-1 株，大鼠冠状病毒 ）。 4.4 结果分析 检验合格的动物继续饲养，不合格动物整批淘汰。 4.5 实验过程中哨兵鼠监测： 4.5.1 哨兵鼠种类 ： ICR 小鼠， SD 大鼠。 4.5.2 哨兵鼠饲养：每排笼架对角线位置 放 （左上 +右下或者左下 +右上） 2 笼哨兵鼠， 每笼 2只。 哨兵鼠所用垫料为同排笼盒换下来的脏垫料混合少许新鲜垫料，饲 料 与饮水与实验鼠相同。 4.5.3 检测项目： 清洁级小鼠（沙门菌，支原体，鼠棒状杆菌，泰泽病原体， 鼠痘病毒，小鼠肝炎病毒，仙台病毒 ）； SPF 级小鼠 （沙门菌，支原体，鼠棒状杆菌，泰泽病原体， 嗜肺巴斯德杆
17、菌，肺炎克雷伯杆菌，金黄色葡萄球菌，绿脓杆菌， 鼠痘病毒，小鼠肝炎病毒，仙台病毒 ，小鼠肺炎病毒，呼肠孤病毒 III 型，小鼠细小病毒 ，体外寄生虫 ，弓形虫，全体蠕虫，鞭毛虫，纤毛虫 ）；清洁级大鼠（ 沙门菌，支气管鲍特杆菌，支原体，鼠棒状杆菌，泰泽病原体， 汉坦病毒，仙台病毒 ）； SPF 级大鼠（ 沙门菌，支气管鲍特杆菌，支原体，鼠棒状杆菌，泰泽病原体，肺巴斯德杆菌，肺炎克雷伯杆菌，金黄色葡萄球菌，绿脓杆菌， 汉坦病毒，仙台病毒，小鼠肺炎病毒，呼长孤病毒 III 型，大鼠细小病毒 RV株，大鼠细小病毒H-1 株，大鼠冠状病毒 ，体外寄生虫，弓形虫，全体蠕虫，鞭毛虫，纤毛虫 ）。 4.5.
18、4 检测 频率： 两 个月一次。 4.6 结果分析 ：根据国标规定和 具体 实验需要作出合适的结果判定。 高标准繁育型实验动物检疫标准操作规程 题目：高标准 繁育型 实验动物检疫标准操作规程 第 1 页，共 2 页 制定人：李秀，黎宁，杨寿清 制定日期： 2013.04.25 审核人： 实验动物管理与动物福利伦理委员 会 审核日期： 2013.05.29 批准人： 实验动物管理与动物福利伦理委员 会 批准日期： 2013.05.31 生效日期： 2013.09.01颁发日期： 2013.06.05 修订人： 修订日期： 编写 /修订记录 版本 摘要 生效日期 编写 /修订 批准 1 目的 摸清
19、实验动物微生物 系 的状况， 保证特别实验对实验动物体内病毒、病原菌和寄生虫的要求，预防传染性疾病发生 ，减少对实验人员和中心设施的潜在威胁 ，制定本程序 。 2 适用范围 境外引进品种， 对实验动物微生物系要求高 的实验项目 。 3 职责 3.1 实验动物中心管理人员负责监督、管理； 3.2 严格遵守相应级别实验动物检疫操作流程。 4. 流程 4.1 新引进的动物必须隔离饲养于检疫室 5-7 天，确认无异常后，移入饲养间。 4.2 动物观察内容： 4.2.1 皮毛： 有无光泽、竖毛、出血、污物、脱毛等 4.2.2 眼 ： 有无眼屎、流泪 、角膜损伤等 4.2.3 口腔 ： 有无流涎、出血等
20、4.2.4 耳 ： 有无外伤、耳壳曲折等 4.2.5 四肢 ： 有无外伤、弯曲脱臼、肿胀等 4.2.6 肛门 ： 有无腹泻、血便、脱肛等 4.2.7 精神和食欲 ： 有无沉默、倦怠、不活跃、食欲不振、拒食等 4.2.8 营养状况 ： 有无消瘦、过度肥胖、成长异常等 4.2.9 姿势和步态 ： 有无姿势异常、行走和站立困难、运动失调、跛行等 4.2.10 触觉 ： 弹性、硬度、肿胀、疼痛等 4.3 新动物 国标全项检测 ： 4.3.1 实验动物的选择： a.新进实验动物满 5 周龄（断奶后 2 周）随机抽取 3%（最少 3 只 ）购买需做好预算。 b.不满 5 周龄的老鼠不可直接检疫，需生产单位
21、提供对方动物房内的哨兵鼠或者其他能代表该批小鼠健康情况的鼠，对此检疫。或者该批小鼠隔离饲养，到 5 周龄进行检疫。 c.供检疫的鼠采需 0.2ml，采血后老鼠死亡或者不适合进行科研实验，对于特别珍贵的老鼠可以与本设施内原有小鼠一起养 3 周后检测设施内的鼠。 4.3.2 送检样品： 动物 活体。 4.3.3 送检方法： 实验动物 放入高效滤网通风的运输盒，放入饲料和饮水，由专人携带到南京大学模式动物研究所检测。 4.3.4 检测项目： 详见国标 GB14922.2-2011（全项） 。 4.4 实验过程中哨兵鼠监测： 4.4.1哨兵鼠种类： ICR 小鼠， SD 大鼠。 4.4.2哨兵鼠饲养：每排笼架对角线位置 放 （左上 +右下或者左下 +右上） 2 笼哨兵鼠， 每笼 2只。 哨兵鼠所用垫料为同排笼盒换下来的脏垫料混合少许新鲜垫料，饲养与饮水与实验鼠相同。 4.4.3送检样品：哨兵鼠活体。 4.4.4送检方法： 4 只哨兵鼠放入高效滤网通风的运输盒，放入饲料和饮水，由专人携带到南京大学模式动物研究所检测。 4.4.5检测项目： 详见国标 GB14922.2-2011（全项） 。 4.4.6送检频率： 两 个月一次 。 4.4.7检测周期：两周。 4.5 结果分析 ：根据国标规定和 具体 实验需要作出合适的结果判定。
