1、第一章 药物分析的任务与发展药物分析是一门研究药品及其制剂的组成、理化性质、真伪鉴别、纯度检查及其有效成分的含量测定等的一门学科。目的是保证人们用药安全、合理、有效。药品用于防病、治病、诊断疾病、改善体质、增强机体抵抗力的物质。药典是一个国家关于药品标准的法典，是国家管理药品生产与质量的依据。第二章 药物分析的基础知识第一节 药品检验工作的基本程序一般为取样、鉴别、检查、含量测定、写出报告。取样：鉴别：判断真伪。 检查：称纯度检查，判定药物优劣。 含量测定：测定药物中有效成分的含量。检验报告必须明确、肯定、有依据。计量仪器认证要求：县级以上人民政府计量行政部门负责进行监督检查。符合经济合理、就
2、地就近。第二节 药品质量标准分析方法验证目的是证明采用的方法适合于相应的检测要求。验证内容：准确度、精密度(包括重复性、中间精密度和重现性) 、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性。一、准确度： 是指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般以百分回收率表示。至少用 9 次测定结果进行评价。二、精密度： 是指在规定的条件下，同一个均匀样品，经过多次取样测定所得结果之间的接近程度。用偏差、标准偏差或相对标准偏差表示。1、 重复性：相同条件下，一个分析人员测定所得结果的精密度称为重复性。至少 9 次。2、 中间精密度：同一个实验室，不同时间不同分析人员用不同设备测定结果的精密度。3、
3、重现性：不同实验室，不同分析人员测定结果的精密度。分析方法被法定标准采用应进行重现性试验。三、专属性：指在其他成分可能存在的情况下，采用的方法能准确测定出被测物的特性，用于复杂样品分析时相互干扰的程度。鉴别反应、杂质检查、含量测定方法，圴应考察专属性。四、检测限：指试样中被测物能被检测出的最低量，无须定量。用百分数、ppm 或 ppb 表示。五、定量限：指样品中被测物能被定量测定的最低量，测定结果应具一定的精密度和准确度。六、线性：系指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。七、范围：能达到一定的精密度、准确度和线性的条件下，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。八、耐用
4、性：指在一定的测定条件稍有变动时，测定结果不受影响的承受程度。第三节 药物分析的统计学知识测量误差：测量值和真实值之差。 绝对误差和相对误差。真实值：是有经验的人用最可靠的方法对试样进行多次测定所得的平均值。系统误差：(1)方法误差 (2)试剂误差 (3)仪器误差 (4)操作误差偶然误差：不可定误差或随机误差，由偶然原因引起。可增加平得测定次数。测量值的准确度表示测量的正确性，测量值的精密度表示测量的重现性。精密度是表示准确度的先决条件，只有在消除了系统误差后，才可用精密度同时表达准确度。提高分析准确度方法：1、选择合适的分析方法 2、减少测量误差 3、增加平行测定次数4、消除测量过程中的系统
5、误差(校准仪器、做对照试验、做回收试验、做空白试验)有效数字的处理：0.05060g 是四位有效数字。首位是 8 或 9，有效数字可多记一位。PH=8.02 是两位有效数字。四舍六入五成双原则。修约标准偏差或其他表示不确定度时，修约结果可使准确度估计值变得差一点。S=2.13-2.2 G 检验法、4d 法，舍去。第四节 药品质量标准制定的原则和基本内容原则：安全有效，技术先进，经济合理。 检验方法：准确、灵敏、简便、快速。(一)、名称：(二)、性状：1、外观、臭、味和稳定性 2、溶解度：一定程度上反映药品的纯度。3、物理常数(1)馏程：2000 规定：在标准压力(101.3kPa)下，按药典装
6、置，自开始馏出的第五滴算起，至供试品仅剩 34ml 或一定比例的容积馏出时的温度范围。(2)熔点：系指一种物质固体熔化成液体的温度，熔融同时分解的温度，或在熔化时自初熔至全熔的一段温度。(3)凝点：系指一种物质由液体凝结为固体时，在短时间内停留不变的最高温度。(4)比旋度：具光学异构体分子的药物，旋光性能不同。按干燥品或无水物计算。准确至 0.01 。(5)折光率：光线自一种透明介质进入另一种透明介质时，两种介质密度不同，光的进行速度发生变化，即发生折射现象，遵从折射定律。对于液体药品，尤其是植物油，检查药品的纯杂程度，测定溶液的浓度。(6)粘度：流体对流动的阻抗能力。共三法，毛细管内径。(7
7、)吸收系数：物质对光的选择性吸收波长。(三) 鉴别：用理化方法或生物学方法来证明药品真实性的方法。对已知物。(四) 杂质检查：有效性，纯度要求和安全性。 1、有效性试验 2、酸碱度 3、溶液的澄清度与颜色 4、无机阴离子：氯化物和硫酸盐。5、有机杂质 6、干燥失重和水分 7、炽灼残渣：指硫酸化灰分，用于考察有机药物中混入的无机杂质。一般限度为 0.1% 。8、金属离子和重金属检查 每日剂量 0.5g-以上且长期服用的品种。9、硒和砷：硒检查有：醋酸地塞米松、醋酸曲安奈德及醋酸氟轻松。第一法：古蔡氏法10、安全性检查(五)含量测定或效价测定： 理化方法称含量测定 生物学方法或生化方法测定称效价测
8、定。1、 容量分析法：化学原料药含量测定的首选法。中和法、非水滴定法、银量法、络合法、碘量法、重氮化法。2、 重量法：精密度好准确度高，繁琐，不能应用容量法时用。挥发法、萃取法、沉淀法3、 紫外分光光度法：简便、快速。原料药避免。4、 气相色谱法：分离效果优越，对含杂质和挥发性的原料药效好。维生素 E5、 高效液相色谱法：用于多组分抗生素，生化药品或因杂质干扰测定。常规方法又难分离药品。第三章 药典知识中国药典：凡例(30 条)、正文、附录和索引。溶解度：极易溶解： 1ml 中溶解 温度： 水浴温度： 98-100易溶： 1 - 10ml 中溶解 热水： 70-80溶解： 10 - 30ml
9、中溶解 微温或温水 ：40-50略溶： 30 - 100ml 中溶解 室温： 10-30微溶： 100 -1000ml 中溶解 冷水： 2-10极微溶：1000-10000ml 中溶解 冰浴： 0几乎不溶：10000ml 中不能完全溶 放冷：放冷至室温液体的滴系指在 20 C 时，1.0ml 水相当于 20 滴。粉末粗细： 最粗粉：指能全部通过一号筛，但混有能通过三号筛不超过 20%的粉末。粗粉： 指能全部通过二号筛，但混有能通过四号筛不超过 240%的粉末。中粉： 指能全部通过四号筛，但混有能通过五号筛不超过 60%的粉末。细粉： 指能全部通过五号筛，并含能通过六号筛不少于 95%的粉末。极
10、细粉：指能全部通过六号筛，并含能通过七号筛不少于 95%的粉末。最细粉：指能全部通过八号筛，并含能通过九号筛不少于 95%的粉末阴凉处： 不超过 20 C 凉暗处：避光不超过 20 C 冷处：2-10 C称 1.0，指 0.06-0.14 。 称 2.0g，指 1.5-2.5 g 2.00g 指 1.995-2.005g 。精密称定：准确至千分之一。 称定：准确至百分之一。 取用量为“约”： 10%垣重：连续两次差异在 0.3mg 以下，干燥离第一次 1 小时后，炽灼离第一次 30 分后。第四章 物理常数测定法一、熔点：第一法：测定易粉碎固体药品：先干燥，熔点 135 C 以上，105 C 干
11、燥，135 C 以下，五氧化二磷干燥器。装入供试品高度 3mm，距 2.5mm。升温速度每分钟 1-1.5 C。第二法：测定不易粉碎固体药品：先熔融，两端开口吸入 ，高度 10mm ，放置 24h。0.5 C第三法：测定凡士林及其他类似物质。3 次或 5 次 鉴别，反映药品的纯杂程度 二、旋光度测定法：比旋度：偏振光透过 1dm 且每 1ml 中含有旋光性物质 1g 的溶液，在一定波长与温度下测得的旋光度称为比旋度。用于鉴别药物或检查药物的纯杂程度、含量测定。以溶剂作空白校正，调节温度至 20 C 0.5C 。供试液不显混浊或有小粒。公式：三、折光率测定法：指光线在空气中进行的速度与在供试品中
12、进行速度的比值。鉴别、纯度、含量折光率因温度或光线波长的不同而改变。20 C 0.5 。 读到 0.0001 公式：n-溶液的折光率 n-同温度时水的折光率 F-被测液浓度增加 1%时折光率增加数。 用作葡萄糖的快速测定用。四、粘度测定法：用于区别或检查药品的纯杂程度。粘度分三种：动力粘度：帕秒 (Pa.s) 运动粘度：平方毫米每秒 (mm /s)第五章 化学分析法第一节 重量分析法重量分析法：以质量为测量值的分析方法。将被测组分与其他分离，称重计算含量。精确到 0.1-0.2 %对低含量组分测定误差较大，尽量避免用。水分测定，药品中水中不溶物、炽灼残渣、灰分仍用。一、挥发法：利用被测组分具有
13、挥发性或将其转化为挥发性物质，称取挥发前后挥发性物质算含量。1、 直接挥发法：测吸收剂增加的量2、 间接挥发法：测样品所减少的量二、萃取法：(提取重量法)用互不相容的溶剂萃取后称重，适用于有机药物的测定。三、沉淀法：沉淀形式称量形式步骤：取样溶解加沉淀剂使其沉淀过滤洗涤干燥(或炽灼) 至垣重称量计算重量分析法对沉淀形式要求：沉淀溶解度小，要纯净，易于过滤和洗涤，易于转化为称量形式。重量分析法对称量形式要求：称量形式的组成应固定，化学稳定性高，分子量要大。1、 沉淀形成的过程包括晶核的生长和沉淀微粒的生长两个过程。2、 影响沉淀溶解度的因素： 沉淀溶解损失不超过 0.2mg 不影响。(1)同离子
14、效应：当沉淀反应达到平衡后，向溶液中加入过量的沉淀剂，则构晶离子 (与沉淀组分相同的离子) 浓度增大，使沉淀的溶解度降低的效应，称为同离子效应。加入沉淀剂一般过量，易挥发过量 50100%，不挥发过量 2030% 。(2)盐效应：由于强电解质的存在而引起沉淀溶解度增大的现象，称盐效应。(3)酸效应：溶液的酸度对沉淀溶解度的影响称酸效应。 对弱酸盐影响较大。(4)络合反应：进行沉淀反应时，若溶液中存在有能与构晶离子生成可溶性络合物的络合剂时，则会使沉淀溶解度增大，甚至不产生沉淀，这种现象称络合效应。3、 影响沉淀纯度的因素：(1)共沉淀：产生原因有表面吸附( 主要)、形成混晶、包埋或吸留(不能清
15、洗除去，重结晶陈化)(2)后沉淀：放置过程中沉淀吸出。第二节 酸碱滴定法酸碱滴定法：利用酸和碱在水中以质子转移反应为基础的滴定分析方法。(一) 强酸滴定强碱： 如 NaOH 滴定 HCl一般浓度以 0.1000mol /l ，突跃范围 4.39.7，指示剂 ：酚酞、甲基红、甲基橙(二)强碱滴定弱酸： 如 NaOH 滴定 HAc，突跃范围 PH 7.749.7 ，计量点 PH8.72 。选碱性范围指示剂酚酞、百里酚酞。不能用酸性指示剂甲基红，甲基橙。(三)强酸滴定弱碱：HCl 滴定 NH .H O ，PH6.24 4.3 ，计量点 PH5.28 ，选甲基红、溴甲酚绿 。(四)强碱滴定多元酸：两个
16、计量点，用甲基橙和酚酞的混合指示剂。第三节 沉淀滴定法沉淀反应必须定量、迅速、有指示剂确定终点、吸附现象不妨碍终点。生成难溶性银盐的反应。银量法：利用 AgNO 为标准溶液的沉淀滴定法。按所用指示剂不同分：一、铬酸钾法(MoHr 法) ：在中性溶液中，加入 K CrO (1ml)作指示剂，用 AgNO 标准液滴定 。滴定条件：指示剂用量适当、酸度不过低过高、剧烈振摇、不宜测定 I 和 SCN、除去干扰离子。二、铁矾指示剂法(Volhard 法 )：用 NH SCN 为标准溶液， Fe 为指示剂，在硝酸酸性液中测定。滴定条件：被测物 C时，注意沉淀转化（过滤、加有机溶剂、用高浓度 F指示） 、强
17、酸中三、吸附指示剂法（Fajans 法）：用硝酸银标准溶液和吸附指示剂确定终点的方法。第四节 配位( 络合)滴定法EDTA(二乙胺四乙酸)与金属离子络合的特点：几乎全部、1：1 关系、可在水中滴定、大多无色影响络合反应平衡因素：酸度增高，MY 稳定性降低；其他络合剂存在时也降低 MY 稳定性。第五节 氧化还原滴定法涉及电子转移的反应叫氧化还原反应，获得电子的物质称氧化剂(电位高) ，失去电子的物质称还原剂。氧化还原反应是否完全用平衡常数 K，K 值越大，反应进行越完全，不说明反应速度 。指示剂三类：自身指示剂、特殊指示剂和氧化还原指示剂。氧化还原滴定方法：(一)、碘量法：1、直接碘量法：终点：
18、过量一滴 I 与淀粉(KI 液)生成蓝色吸附物。碘本身淡黄色。条件：只能在酸性、中性、弱碱性进行。避免曝光和放置时间长(氧化) 。2、间接碘量法：只能在弱酸性、中性、弱碱性进行，增大 KI 量。(二)、溴量法：主要测定芳香胺类和酚类有机药物。苯环上有羟基和氨基，邻位和对位氢易溴代反应。一般用定量的溴酸钾与过量的溴化钾产生新生态的溴来代替。提高温度加快反应。(三)、铈量法：用邻二氮菲亚铁作指示剂 优点：Ce (SO ) ，稳定，长时、曝光、加热不引起浓度变化 、在 HCl 下测定、大部分有机物不作用，特别适合糖浆剂、片剂等制剂测定。(四)、高锰酸钾法：自身指示剂 条件：强酸中进行( 氧化能力强
19、)、用 H SO 调节酸度(无氧化还原性)(五)、高碘酸钾法：(六)、亚硝酸钠法：在盐酸下与芳伯胺或芳仲胺化合物起重氮化反应。条件：温度不宜过高(防 HNO 分解) ，强酸，滴定不宜过快。第六节 非水滴定法碱量法：以冰醋酸(或其他溶剂 )为溶剂，高氯酸作滴定液、结晶紫为指示剂测定弱碱性物质及盐类。酸量法：以甲醇钠为滴定液、麝香草酚蓝作指示剂，乙二胺等为溶剂滴定弱酸性物质及盐类。原理：1、溶剂的酸碱性：弱酸性物质溶于碱性溶剂时，可增强物质的相对酸度。2、溶剂的离解性：溶剂的自身离解常数越大，突跃范围越大，终点越敏锐。3、溶剂的极性：溶剂在极性强的溶剂中，介电常数大，易离解，酸(碱) 强度大。4、
20、拉平效应与区分效应：水(拉平) 、冰醋酸(区分)。碱的测定：高氯酸的冰醋酸溶液为滴定剂，邻苯二甲酸氢钾作基准物质。测定碱性基团的药物：胺类、氨基酸类、含氮杂环、有机碱的盐、弱酸盐。生物碱、咖啡因、盐酸麻黄碱、扑尔敏。酸的滴定：羧酸类：苯甲酸 酚类、苯酚：磺酰胺类、磺胺嘧啶。第六章 分光光度法第一节 紫外可见分光光度法一、基本原理紫外-可见分光光度法：是根据物质分子对波长为 200760nm 这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重现性好。波长长(频率小)的光线能量小，波长短(频率大) 的光线能量大。100nm 200nm 400nm 800nm
21、 400um 1m通指X-射线 紫外区 可见区 红外区 微波区 无线电波区Beerlambert 定律： A=E l c A-吸收度 E吸收系数 l -液层厚度 c-溶液浓度吸收度浓度与厚度的关系。是吸收光度法的基本定律，重要前提是单色光。摩尔吸收系数：指在一定波长下，溶液浓度为 1mol/L , 厚度为 1cm 时的吸收度，用 表示。百分吸收系数：指在一定波长下，溶液浓度为 1%(W/V) , 厚度为 1cm 时的吸收度，用 表示。影响 Beer 定律因素：化学因素，光学因素二、紫外-可见分光光度计： 主要部件：1、 光源：要求光谱的光源，氢灯和钨灯(350nm)2、 单色器：进口狭缝、准直
22、镜、色散元件(棱镜和光栅) 、聚焦透镜和出口狭缝组成。3、 吸收池：用光学玻璃制成的吸收池，只能用于可见光区。用熔融石英(氧化硅) ，可见紫外光区。4、 检测器：光电池：(硒光电池：用于可见光；硅光电池：紫外可见光) 内阻小，易疲劳。光电管：内阻高，电流易放大 。5、 讯号处理和显示器三、定性与定量方法：(一)、定性鉴别：是多数有机化合物具有吸收光谱特征。一般用对比法。1、对比吸收光谱特征数据 2、对比吸收度(或吸收系数)比值 3、对比吸收光谱的一致性(二)、纯度检查：杂质检查与杂质限量检测(三)、含量测定：1、吸收系数法 2、标准曲线法 3、对照法 第二节 荧光分析法荧光分析法：利用荧光的物
23、理特性而进行定性与定量测定的方法。荧光法比紫外可见灵敏。荧光光度计：激发光源、样品池、检测器、滤光片和单色器。第三节 红外分光光度计红外线：波长大于 0.76um，小于 500um 的电磁波。 Hooke 定律来描述分子的伸缩振动。当分子的振动频率与入射的红外频率相同时，分子对红外产生吸收。伸缩振动和弯曲振动。基频峰：分子吸收一定频率的红外线，振动能级由基态(V=0)跃迁至第一激发态时产生的吸收峰。倍频峰：振动能级由基态跃至第二、三激发态。统称泛频峰。吸收峰：用于鉴别官能团存在的吸收峰称特征吸收峰。指纹区：1250-400cm (8.025um)的低频区称为指纹区。红外分光光度计主要部件：光源
24、、吸收池、单色器(棱镜和光栅) 和检测器(真空热电偶)及记录装置。第七章 色谱法第一节 概述色谱法：是一种物理或物理化学分离方法。用于定性鉴别、纯度检查、含量测定。分配系数：组分在固定相和流动相之间的分配平衡时的浓度之比。 K=容量因子：又称质量分配系数，即达到分配平衡后，组分在固定相和流动相中的质量之比。 第二节 薄层分析法一般指吸附薄层色谱法，固定相为吸附剂的薄层吸附法。K 值越大随展开剂移动的速度越慢。比移徝：在薄层色谱法中，组分的迁移距离( )与展开剂的迁移距离 ( )之比称为比移值( ) 。R 最佳范围是 0.30.5 ，可用范围是 0.20.8 。吸附剂：吸附薄层色谱法的固定相。常
25、用吸附剂有：硅胶、氧化铝、硅藻土、纤维素和聚酰胺。硅胶：在 105110 C 加热 30 分，使硅胶吸附力增加，称为活化。具微酸性，适分离酸性中性物质。氧化铝：碱性、中性、酸性。中性用得多。制备薄层板：要求吸附剂涂布均匀表面光滑，使用前检查均匀度。2000 版用机械涂布法。活化。吸附剂与展开剂的选择：分离极性较强的组分时，宜选用活性低(活度级别高) 的薄层板，以极性强的展开剂展开。反之点样：体积宜在 20ul 以下，样径不超过 23mm ，点间距离为 1.52.0cm，距底 2.0cm 。显色方法：直接喷雾法、浸渍法、压板法。定性分析方法、纯度检查、定量分析方法(洗脱测定法和直接测定法) 。第
26、三节 气相色谱法气相色谱法：以气体为流动相的色谱法称为气相色谱法。不适用于难挥发和热稳定性差的物质分析。原理：各组分在固定相与载气(流动相) 间分配系数不等，按大小依次被载气带出色谱柱，小先流出。一、基本原理：(一)、基本概念：一个组分的色谱峰用三项参数：峰高或峰面积(用于定量)、峰位(用保留值表示，用于定性)、峰宽 (用于衡量柱效) 。(1)、保留时间 (tR) ：从进样开始到某个组分的色谱峰顶点的时间间隔。(2)、死时间 (t0)：分配系数为零的组分的保留时间。(3)、相对保留值 (r)：两组分的调整保留值之比。(4)、半峰宽 (Wh/2)：峰高一半处的峰宽。(二)、塔板理论：塔板理论方程
27、式(高斯方程式 )：理论塔板式数： 理论塔板高度：(三)、速率理论： H=A+B/u+Cu影响塔板高度的因素：1、涡流扩散 2、纵向扩散 3、传质阻抗二、气相色谱仪：(1)、色谱柱：固定相与柱管组成。 填充柱、毛细管柱； 分配柱、吸附柱(2)、固定液：高沸点的液体，操作下为液态。 甲基硅油、聚乙二醇等选择原则：按相似性、按主要差别、按麦氏差别选择。(3)、载体：化学惰性的多孔性微粒 (4)、毛细管色谱柱：开管型、填充型(5)、检测器：1、浓度型检测器：热导检测器和电子捕获检测器2、质量型检测器：氢焰离子化检测器中国药典 2000 对气相色谱规定：除检测器种类、固定液品种及特殊指定的色谱柱材料不
28、得任意更改外，其他均可适当改变，色谱图于 30min 内记录完毕。第四节 高效液相色谱法一、基本原理：影响柱效的主要因素是涡流扩散和传质阻抗。分类：1、液固吸附色谱法：流动相为液体，固定相是固体吸附剂。2、液-液分配色谱法：固定相几乎全是化学键合硅胶，又称化学键合相色谱法。按固定相和流动相的极性 2 又分：正相色谱法和反相色谱法正相色谱法：流动相极性小于固定相极性的色谱法。用于分离溶于有机溶剂的极性及中等极性的分子型物质，用于含有不同官能团物质的分离。 极性弱组分先流出反相色谱法：大于 用于分离非极性至中等极性的分子型化合物二、高效液相色谱仪：1、高压输液泵 2、色谱柱 3、进样阀 4、检测器
29、：紫外吸收检测器、荧光检测器、差示折光检测器、电化学检测 中国药典 2000 对高效液相色谱法规定：除固定相种类、流动相组分、检测器类型不得任意更改外，其余均可适当改变，色谱图于 20min 内记录完毕。第五节 色谱系统适用性试验和定量分析方法一、系统适用性试验1、 色谱柱的理论板数：2、 分离度：应大于 1.5 3、重复性3、 拖尾声因子：0.951.05 之间二、定量测定法：1、内标法加较正因子测定供试品中某个杂质或主成分含量2、外标法测定供试品中某个杂质或主成分含量3、加较正因子的主成分自身对照法不加较正因子的主成分自身对照法第六节 电泳法电泳法：在电场的作用下，依据各组分之间淌度的不同
30、实现分离的方法。分离程度取决于淌度之差。一、基本原理： 电泳迁移速度为： ：电泳淌度 ：电场强度影响电泳分离的条件：1、缓冲液的 PH 值和离子强度 2、电场强度 3、样品浓度二、电泳仪：三、各类电泳法：(1)、纸电泳法 (2)、醋酸纤维素电泳法：主要用于测定蛋白质相对百分含量(3)、琼脂糖凝胶电泳法： (4)、聚丙烯酰胺凝胶电泳法(5)、SDS 聚丙烯胺凝胶电泳法：测定蛋白质的分子量四、毛细管电泳法简介：以弹性石英毛细管为分离通道，高压直流电场为驱动力，依据样品中各组分之间的淌度和分配行为上的差异而实现分离的分析方法。第八章 其他方法第一节 PH 值测定法PH 计：包括 PH 测量电池和 P
31、H 指示器。一、PH 计工作原理：两次测量法二、PH 值测定方法：1、PHmV 选择：2、温度补偿：25时改变一个 PH 单位，电动势改变 59mV，15时改变 57mV。3、仪器校正(定位)和核对：用标准 PH 缓冲液校准，用定位调节钮使 PH 读数与标准液一致。4、测定：中国药典 2000 规定五种标准液 25时为：1.68 ，4.00，6.86，7.41，9.18 。三、注意事项：1、测定前选相差 3 个单位的标准缓冲液，使供试品处于二者之间。2、取较接近的一种进行校正，使仪器与表列数值一致。3、用第二种核对时，误差应不大于 0.02 PH 单位 。重复 否则检查仪器或更换电极。4、电极
32、用水充分洗涤吸干。5、弱缓冲液的测定先用邻苯二甲酸氢钾校正仪器，再用硼砂，直至 1 分内不超过 0.05 单位。第二节 氧瓶燃烧法一、基本原理：将有机物放入充满氧气的燃烧瓶中进行燃烧。二、仪器装置和设备：磨口硬质玻璃锥形瓶 固体样品：无灰滤纸 液体样品：纸袋吸收液：多数水或水-氢氧化钠的混合液，少数水-氢氧化钠-浓过氧化氢混合液、或硝酸溶液三、燃烧操作法四、注意事项 产生烟雾：碘：紫色 溴：红棕色 氟、氯：白色 测定氟化氢用石英制燃烧瓶五、应用：有机卤素、硫、磷及硒等杂质的检查。第三节 脂肪与脂肪油的测定法相对密度系指在相同的温度、压力条件下，某种物质的密度与水的密度之比，温度为 20 C 。
33、液体相对密度用比重瓶进行测定，易挥发液体的相对密度用韦氏比重秤测定 。第四节 X射线衍射法粉未衍射是结晶物质鉴别和纯度检查最常用技术，单晶衍射主要用于分子量和晶体结构的测定。第五节 热分析法一、各类热分析法：1、热重法：测量物质质量与温度关系的一种技术。2、差热分析法：测量待测物质和参比物的温度差。3、差示扫描量热法：测量输给待测物质和参比物的能量差与温度(或时间) 关系的一种技术 。第九章 药物的杂质检查第一节 杂质和杂质限量检查一、药物的纯度：指药物纯净的程度。二、药物中杂质的来源：生产过程中引入和贮藏过程中产生。三、杂质的限量检查：药物中所含杂质的最大允许量称杂质限量 。第二节 一般杂质
34、的检查方法一、氯化物的检查：利用氯化物在硝酸酸性溶液中与硝酸银试液作用，生成氯化物的白色混浊比色。以 50ml 中含硝酸 10 ml 为宜。以内消法消除颜色干扰。二、硫酸盐检查法：是利用 SO 与氯化钡在盐酸酸性溶液中生成硫酸钡的白色浑浊液，比较。加盐酸防碳酸钡或磷酸钡沉淀生成，50ml 中含稀盐酸 2 ml ，PH =1 。内消法三、铁盐检查法：中国药典采用硫氰酸盐法检查药物中的铁盐杂质。铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氰酸铵生成可溶性硫氰酸铁配位离子，比较。50ml 中含稀盐酸 4 ml 为宜。四、重金属检查法：指在实验条件下能与 S 作用显色的金属杂质，以铅为代表。药典收载四法：第一法：硫代乙酰
35、胺法：用醋酸铅缓冲液(PH 3)，以硝酸铅配制标准铅贮备液，用外消色法。用于在实验条件下供试品澄清、无色、对检查无干扰或经处理后对检查无干扰的药物。第二法：是将供试品炽灼破坏后检查或取炽灼残渣下遗留的残渣进行检查的方法。用于水、乙醇中难溶或能与重金属离子形成配位化合物而干扰检查的有机药物。500-600 C 第三法：用于难溶于稀酸但能溶于碱性水溶液(磺胺类、巴比妥类) NaOH +水+NaS第四法：微孔滤膜法。形成铅斑比较。五、砷盐检查法：(一)古蔡法：加入碘化钾与氯化亚锡将五价砷还原为三价砷，抑制锑化氢生成。醋酸铅棉花吸收硫化氢。含锑药物：改用白田道夫法检查，加少量二氯化汞提高反应灵敏度。(
36、二) 二乙基二硫代氨基甲酸银法(AgDDC 法)：原理：砷化氢与 AgDDC 吡啶溶液作用，使 AgDDC 中银还原为红色胶态。六、酸碱度的检查：检查药物的酸碱性杂质。所用水为新沸放冷至室温的水。1、酸碱滴定法 2、PH 值法 3、指示剂法七、溶液颜色检查法：控制药物中有色杂质的含量。 1、对照比色 2、分光光度法八、易炭化物检查法：检查药物中遇硫酸易炭化或易被氧化而呈色的微量有机杂质。九、澄清度检查法：检查药物中微量不溶杂质，用作注射剂的原料药一般作此项检查。药典 0.5号。十、炽灼残渣检查法：检查有机药物中混入的各种无机杂质。 一般为 0.10.2%十一、干燥失重测定法：经干燥所减失的重量
37、，主要为水分，也包括其他挥发性物。1、 常压恒温干燥法：连续两次差异 0.3mg 以下，继续 1h，105 C2、 干燥剂干燥法：受热易分解或挥发药物，干燥剂有硅胶、浓硫酸、二氧化二磷。3、 减压干燥法：适用于低熔点，受热不稳定或水分难赶除的药物。第三节 特殊杂质的检查方法一、直接检查：二、显色法和沉淀法：利用杂质与一定试剂反应产生颜色与沉淀进行检查 。三、容量分析法：通过消耗滴定液的体积不超过一定量来控制。四、旋光度法：利用杂质与药物旋光性质不同检查。五、分光光度法：紫外分光光度法、红外分光光度法(用于药物中无效或低效晶型的检查)六、色谱法：分离后再检查1、薄层色谱法：(1)杂质对照品法 (
38、2)高低浓度对比法2、纸色谱法：用于极性较大的药物的杂质的检查3、高效液相色谱法：分离效能高，应用广。4、气相色谱法：用于药物中挥发性杂质的检查，如残留的溶剂。第十章 醇、醚、醛类药物的分析第一节 醇类药物的分析典型药物有乙醇、甘油、二巯丙醇和山梨醇。一、主要鉴别试验(一) 碘仿反应：乙醇在碘液中氧化成甲酸盐，有碘仿臭气并见黄色碘仿沉淀。 (二) 丙烯醛反应： 甘油：与硫酸氢钾发生丙烯醛的刺激性臭气。二巯丙醇与碳酸钠类似反应。(三) 沉淀反应：二巯丙醇与醋酸铅-黄色沉淀。二、含量测定：(一) 碘量法：二巯丙醇有强还原性，用碘量法直接测定。(二) 高碘酸钠(钾)法：山梨醇和山梨醇注射液的含量测定
39、。第二节 醚类药物的分析麻醉乙醚有如下检查项目：1、酸度：醋酸量，易刺激呼吸道。 2、醛类：具刺激性，麻醉时分泌物增加。3、过氧化物：贮备过程中易产生，二羟乙基过氧化物。4、异臭：原料乙醇中引入的杂醇油 5、不挥发物第三节 醛类药物的分析包括甲醛溶液、水合氯醛、乌洛托品。一、鉴别试验：(一) 甲醛的鉴别：具还原性，能还原具氧化性的金属盐类。能还原氨制硝酸银溶液，生成银镜。(二) 水合氯醛的鉴别：加水溶解，加碱试液浑浊，加温成澄明两层液，产生氯仿臭气。(三) 乌洛托品的鉴别：加稀酸加热，分解成甲醛和铵盐，遇氨制硝酸银成黑色金属银。二、含量测定：(一) 氧化后剩余滴定法：甲醛碱性被氧化(二) 碱水解后银量法：水合氯醛测定法(三) 酸水解后剩余滴定法：乌洛托品的定量分析第四节 酮类药物的分析一、概述：含量测定：扑米酮(氮测定法) 、吡喹酮(高效液相色谱法)、富马酸酮替芬( 非水溶液滴定
