1、中国健康与养老追踪调查血液标本现场工作方案中国疾病预防控制中心北京大学2011 年 6 月目录一、血样采集 .1二、血样处理 .5三、处理后血样保存与现场运输 .9四、血常规检测 .10五、血样现场工作在线录入 .12六、血样远程运输 .12七、现场常见问题与应急处理 .15附件1本项目采集主要受访者及其配偶的静脉血液，用于血常规、总胆固醇（TC） 、高密度脂蛋白胆固醇（HDLC） 、超敏 C 反应蛋白（ hs-CRP） 、糖化血红蛋白和遗传学指标等。血常规测定将在调查县市完成，其余指标将在国家疾控中心指定的实验室统一测定。血样为重要生物样品，为了保证各项指标测定的顺利进行，血样的采集、处理、
2、保存和运输必须严格按照下列要求与步骤进行：一、 血样采集本项目需从每位采集对象采集静脉抗凝血样共 8ml，其中 4ml 的 1 管用于收集血浆和白细胞，2ml 的 2 管分别用于测定糖化血红蛋白和血常规。（一）血样采集对象血样采集对象为本县参加问卷调查的对象，其名单及相关信息由中国疾控中心提供。采集研究对象空腹静脉血。要求研究对象没有血液病，如凝血时间延长、血友病等。并向采集对象强调，在采集血液的前一天晚上要正常饮食，防止第二天空腹时间太长导致低血糖。对于乳腺癌术后病人，要避免有手术史一侧抽血。采血前提醒采血对象保持轻松、安静的情绪。采血时保持坐位。（二）血样采集人员血样采集人员须为有丰富采血
3、经验的医务人员，熟悉抗凝真空采血管（下简称“真空采血管” ）的使用方法，并能够熟练使用；能够掌握采血后的处理方法。血液采集人员可以来自县级疾病预防控制中心，也可以来自指定的医院。2如果来自医院，县级项目调查组长需对其培训，使其明确采血数量、用途、方法及相关操作等。（三）血样采集准备1、联系调查对象，安排采血事宜。采血前要根据中国疾控中心提供的“血液采集对象名单及相关信息”（包括血样采集对象所在的省、县、村、住址、姓名、性别、采血编号、联系电话等信息） ，联系调查对象，通知采血相关事宜，如采血时间、采血地点、交通方式等。此外，还要提醒调查对象采血当日携带知情同意书。对于调查对象不愿采血者，可尽量
4、动员。2、准备所需材料所需材料详见附件 1 “血液标本现场工作材料准备清单 ”。主要包括：采血针、EDTA-K2 抗凝真空采血管、条形码等。此外，还需要一些辅助材料如签字笔、白大衣、一次性橡胶手套、止血带、医用酒精、棉签、消毒液、垃圾袋、利器盒、试管架等。另外需要准备一些点心或含糖饮料，以应对现场采血对象发生低血糖事件。请注意：如果血液采集地点和处理地点不在同一个地方，则还需准备一个转运箱（4环境） ，用于将采集的血液运至处理地点。3、粘贴条形码首先将“血液采集对象名单及相关信息”中的“姓名” 、 “性别”、 “采血编号”复3制到附表 2“血样采集与处理记录表”的前三列中。其次，打印添加了姓名
5、、性别、采血编号三项信息的附表 2。然后，按照采血编号一一对应将采血对象的条形码粘贴到附表 2 的第四列“条码粘贴处” 相应位置上。此外，还要将每位调查对象对应的条形码贴到 3 支真空采血管上（请注意：条形码要沿着冻存管纵向粘贴） 。同一血样提供者的条形码完全一致（编码共有9 位，前六位为县级行政区划代码，第 7 位为村（社区）代码，最后 2 位为个人编码。 ） 。（四）血样采集方式与地点为保证短时间内能够处理血样，采血方式要求为集中采血。县疾控中心要在尽快完成 3 个地方的血样与处理采集工作，并在第一次采血开始 14 天内运至国家项目组。根据调查地点不同，结合实际情况，各项目点可按照距离乡镇
6、卫生院或本县疾病预防控制中心的距离远近就近选择采血地点。如果调查地点为乡村者，可采取以下方式：1、建议采血集中在乡镇卫生院。如距离本县疾病预防控制中心较近，则可以集中在本县疾病预防控制中心。2、如果距离乡镇卫生院或本县疾病预防控制中心较远，为便于组织，也可以集中在村卫生室采血，采血后按就近原则尽快送往乡镇卫生院或本县疾病预4防控制中心。如果调查地点为城市社区，建议采血集中在本县的疾病预防控制中心。（五）血样采集详细步骤本项目共采集静脉抗凝血样 3 管，其中 4ml 的 1 管， 2ml 的 2 管，共 8ml血样。采血步骤如下：1、记录血样采集信息在采血前，采血人员要记录每个对象是否空腹、开始
7、采血的时间，填写“静脉血样采集和处理记录表”中血样采集部分相关内容。 （详见附件 2） 。2、穿刺采血（1）受检者右侧臂为采血部位。选择被采样人静脉穿刺位置，应用止血带，并用碘伏棉签对静脉穿刺位置进行消毒；（2）旋下采血针护套，进行静脉穿刺； （3）采血针的另一端刺穿采血管胶塞的隔膜，血液即流入采血管。在穿刺胶塞时应防止侧穿，避免负压的过早丢失； （4）血液一旦进入采血管即放开止血带（止血带压迫时间不宜超过 40 秒） 。如果采血量不够或无血液流入采血管建议采取以下步骤以期得到满意的结果： 将采血管向前推，确信胶塞被穿透； 调整针头在静脉中的位置； 更换一支新的真空采血管； 如果更换真空采血管
8、后仍不能采血，拆下并丢弃采血针。重复从步骤 1 开5始的操作，重新穿刺。 （5）当采血管中所采集的血液到预期量并且血液停止流入采血管中时，将采血针一端轻轻从采血管拔离； （6）更换 2ml 采血管，重复操作步骤（ 3）（5） ，共采集 2 管 2ml 血样。（7）在采集完血样后应立即轻轻上下翻转 5-8 次，使血液和抗凝剂充分混匀，然后再将采血管竖直向上放置；（8）当完成采样后，将采血针抽出静脉。请受试者用未采血一侧的手用消毒药签对穿刺位置压迫 5 分钟进行止血，避免采血处出现皮下血肿。3、填写“静脉血样采集和处理记录表”(见附 2)采血后相关内容：4ml 血样的有关情况：是否足量；2 管 2
9、ml 血样的有关情况：是否足量。二、血样处理（一）血样运送至处理地点1、如果血样采集在村卫生室，则需按就近原则尽快运送至乡镇卫生院或县疾控中心进行血样处理，运送方式如下；（1） 4ml 全血：需尽快将 4ml 管和 2ml 管血液在 4条件下按照就近原则尽快转移至血样处理地点进行处理。（2） 用于糖化血红蛋白测定的 2ml 血样：4条件下运送至血样处理地点。6（3） 用于测定血常规的 2ml 血样： 尽快常温运至血样处理（血常规测定）地点。2、如果血样采集在乡镇卫生院的，即可直接进行处理。3、如果血样采集在县疾控中心，则可以直接进行处理。4、如果采血人员与血样处理人员不是同一位工作人员，采血人
10、员要将“静脉血样采集和处理记录表” (见附 2)连同血样一起交付给血样处理人员。（二）处理地点与时间所有血样处理均在本县疾病预防控制中心实验室或乡镇卫生院进行。该实验室必须具备血液处理的基本条件，至少具备如下条件：离心机（转速可达3000 转/分钟） 、冷藏箱、冰箱等。如果处理地点不能完成血常规测定，则需提前协调医院完成。 根据血样用途不同，血液采集后处理的时间要求也不同。对于血样处理和采集不在同一地点的，应尽快在要求的时间内将血样运至指定的地点（如县区CDC 或乡镇卫生院）进行处理。1、用于分离血浆和白细胞的 4ml 血液，血样应在血样采集后的 2 小时内离心完毕。2、用于测定血常规的，血样
11、应在 2h 内予以测定。3、用于测定糖化血红蛋白的，血样应在采集后立即放入转运箱或冰箱内7（4）保存。（三）处理人员血样处理人员需具备实验室操作的基本技能，具有血样离心、分离的工作经验；能够熟练使用离心机，熟练操作加样器。（四）处理准备1、材料与设备准备详见附件 1 “血液标本现场工作材料准备清单”。主要包括加样器及吸头、条形码、冻存管、冻存盒及冰箱（含冷藏、冷冻层）等。2、粘贴条形码根据“静脉血样采集和处理记录表”上列出的已经提供血样者名单及编码信息，血样处理人员可将每位血样提供者对应的条形码粘贴到备好的 4 支不同颜色盖子的冻存管上（请注意：条形码要沿着冻存管纵向粘贴） 。同一血样提供者的
12、条形码完全一致。（五）处理方法1、用于分离血浆和白细胞的采血管，血样应在 3000rpm 下离心 10 分钟。分离血浆后，按顺序分装进入 3 个不同颜色盖子的冻存管（红、黄、蓝盖） 。白细胞分离后单独装入 1 个透明盖子冻存管。剩余含有红细胞的采血管必须按照医8疗废物管理条例进行处置。2、用于测定糖化血红蛋白的采血管，血样不需任何处理，采集后即进行冷藏（4）保存。3、用于测定血常规的采血管，血样应在 2 小时内上机测定。如果本单位未开展血常规测定，则需提前协调县医院进行测定。血常规测定后的血液及采血管必须按照医疗废物管理条例进行处置。（六）详细操作步骤1、记录血样处理时间 地点血样处理人员要在“静脉血样采集和处理记录表”中“血样处理”部分，内容包括处理地点、开始处理时间。 （见附件 2 静脉血样采集和处理记录表） 。2、静脉血样处理（1）4ml 采血管中血液的处理（注意：每分离一份血样需要更换一个吸头）1）离心离心速度 3000 转/分钟，离心时间 10 分钟。离心后血液分为 3 层，从上到下依次为血浆层（黄色） 、白细胞层（灰白色云雾狭窄带）和红细胞层（红色）。有时白细胞层不明显，需要仔细辨别。离心后血样分层如下图所示：
