1、BD FACSAria 操作手册 分选设置: 1 检测 laser delay 和 area scaling 2 使用 Accudrop beads 校准 drop delay 分选过程 : 1. 放上收集管或培养板 2. 将样品管放在 loading port,点击 load 3. 调节电压大小,使所要细胞准确分入收集管中。 4. 在 Brower 的窗口下,点击 sort,出来以下窗口,点击 OK。 5. Sorting continues 或者设定一定的数量进行分选 Plate 的分选步骤 1. 将 splash shield 全部推进放分选架的地方 2. 打开分选门和分 选收集室,加上
2、电压,点击 test,和调节 far left stream 的电压,使偏转一路液流通过 splash shield 孔的中心。 3. 点击 Access Stage button,将 ACDU 的 stage调到最前面。 Access Stage button在 sort layout window 中下方一个三角的箭头。 4. 将收集板放在 stage 上,将 plate 的 A1 放在 stage 的前面,分选将从前面的最左面蛇形分选。 5. sort layout window中, device选择 96well-falcon或 者 48well-falcon等,分选模式选择 Sing
3、le Cell,数量选择 1-10 之间均可,按照实验要求调节。 6. 点击菜单 sorthome device,出现 device setup 的对话框 7. 在 device setup 的对话框左边选择收集装置的类型,调节左右前后的箭头按钮,使 far left stream 打在 plate A1 的中心,确定 home 的位置,可点击中间 test sort button 进行测试,确定 home 的位置之后,点击右上角的 set home button 8. 在 sort layout window 中点击 Access Stage button,将 stage 推到最前面,放上要分选的plate。 9. sorthome devicego to home,关闭 10. 点击 Voltage button 打开电压 11. 放上样品,点击 load Accquire 12. sort layout window 中,添加要收集的 gate,点击 sort ok