1.细胞、组织总蛋白的提取：1.1 细胞总蛋白提取：弃去细胞培养板中的液体培养基，用3ml 4预冷的PBS（0.01M pH7.27.3）（平放轻轻摇动1min）洗两次。加入细胞裂解液RIPA(6孔板，每孔40l)，冰上震荡裂解30min，待细胞裂解完成，用细胞刮将细胞刮下，将裂解液全部吸入1.5mlEP管中，4，15000rpm离心15min，用移液器吸取上清液至另一个1.5mlEP管中。按体积分装保存于-80，避免反复冻融。取2uL用于浓度测定蛋白质浓度。1.2 组织总蛋白提取：50-100mg液氮保存组织，于液氮预冷的研钵中研磨成粉，转入1.5mlEP管中，加入细胞裂解液RIPA，震荡裂解30min，待细胞裂解完成，将裂解液全部吸入1.5mlEP管中，4，15000rpm离心15min，用移液器吸取上清液至另一个1.5mlEP管中。按体积分装保存于-80，避免反复冻融。取2uL用于浓度测定蛋白质浓度。2.BCA法测蛋白质浓度：2.1 BCA工作液配制：按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B（50：1）配置适量（根据测定蛋白所
